甜樱桃自交亲和基因SFB4’的分子鉴定

论文摘要

自交不亲和是显花植物预防近亲繁殖和保持遗传变异的一种重要机制,这一机制在植物界中普遍存在。由于自交不亲和是植物生殖过程中的一个重要现象,因此它已成为果树及其它植物研究的热点。与其它自交不亲和的蔷薇科果树相似,甜樱桃显示以S-RNase为基础的配子体自交不亲和。甜樱桃的S4’单元型是由自交不亲和的S4单元型经X射线辐射而产生的花粉部分突变的自交亲和型突变体。一直以来用分子生物学方法无法区别自交不亲和的S4单元型和自交亲和的S4’单元型,直到最近发现SFB（S-单元型特异F-box蛋白基因）是配子体自交不亲和花粉决定子基因。本研究鉴别了自交亲和的S4’单元型的SFB4’基因。用BLAST程序比较SFB4’基因和SFB4基因时发现:SFB4’基因中有4个碱基的缺失,并且这4个缺失碱基是TTTA。利用由SFB4’中的‘TTTA’缺失而产生的SFB4和SFB4’基因之间的序列多态性设计了一对特异扩增SFB4’基因的引物,从而产生了特异鉴别S4’单元型的SFB4’基因特异分子标记。SFB4’基因特异分子标记可以直接在琼脂糖上区分S4和S4’单元型,所以这种标记可以快速应用于樱桃分子辅助育种工程中。因此,本研究给樱桃育种提供了一种简单实用的分子标记。

论文目录

• 英文缩略表
• 摘要
• Abstrsct
• 1 引言
• 1.1 自交不亲和性（self—incompatibility,v SI）
• 1.2 自交不亲和的分类
• 1.3 三种类型的SI机制
• 1.4 茄科型GSI机制中雌蕊决定子的鉴定
• 1.5 茄科型GSI机制的花粉决定子
• 1.5.1 茄科型GSI机制中花粉决定子的鉴定
• 1.5.2 SLF/SFB与S-RNase共进化的原因
• 1.5.3 SLF/SFB作为花粉决定子基因的作用机理
• 1.6 茄科型GSI的反应模型
• 1.7 甜樱桃自交不亲和研究进展
• 1.8 本研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.2.1 CTAB法提取基因组DNA（Doyle and Doyle, 1987）
• 2.2.2 樱桃S基因型的鉴定
• 2.2.3 SFB4和SFB4’基因的序列分析
• 2.2.4 SFB4’基因的特异扩增
• 2.2.5 DNA序列分析
• 3 结果与分析
• 3.1 樱桃S基因型的鉴定
• 3.2 突变基因SFB4’的分子基础研究
• 3.3 突变基因SFB4’的特异分子标记
• 3.3.1 SFB4’基因的特异扩增
• 3.3.2 SFB4’基因特异分子标记的验证
• 4 讨论
• 4.1 突变基因SFB4’中缺失的判断
• 4.2 研发SFB4’基因特异分子标记
• 4.3 SFB4’基因显性特异分子标记的可靠性
• 4.4 SFB4’基因显性特异分子标记的优越性及意义
• 4.5 鉴定SFB4’基因突变的理论意义
• 5 结论与创新点
• 参考文献
• 附录
• 致谢