IETM在非酒精性脂肪性肝病发生发展中的作用

论文摘要

目的:探讨肠源性内毒素血症（intestinal endotoxemia, IETM）与胰岛素抵抗（insulin resistance, IR）之间的关系,研究IETM在非酒精性脂肪肝性肝病（nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）发生发展中的作用。方法:实验1. Wistar大鼠32只,雌雄各半,按随机区组设计,分配雌雄两个区组的大鼠为4组:正常对照组（normal control;NC）以正常饲料喂养,不饱和脂肪酸组（unsaturated fatty acid;NSFA）以不饱和脂肪酸饲料喂养,饱和脂肪酸组（saturated fatty acid;SFA）以饱和脂肪酸饲料喂养,高糖高脂组（high sucrose and high-fat dict;HSF）以高蔗糖高饱和脂肪酸饲料喂养,每组8只,雌雄各半,分笼饲养,造模9周形成NAFLD模型。肝脏苏木素-伊红（HE）、sudanⅣ染色观察肝脂变,透射电镜下观察肝脏细胞及细胞外基质的超微结构变化。测定空腹血糖（FPG）、空腹血胰岛素（FINS）含量,外周血浆游离脂肪酸（FFA）,肝匀浆甘油三酯（TG）,外周血浆及肝组织匀浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,计算胰岛素抵抗指数（IRI,HOMA-IR）及胰岛素敏感指数（ISI）。实验2.动物和分组同实验1,测定外周血浆内毒素（LPS）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）,血浆及肝组织匀浆丙二醛（MDA）含量。免疫组化法测肝脏和腹部脂肪组织TNF-α,检测各组动物肝脏和腹部脂肪组织免疫组化TNF-α的表达。结果:1.NAFLD大鼠模型建立情况:肝脏HE、sudanⅣ染色结果证实:造模九周后,NSFA大鼠为单纯性脂肪肝,SFA、HSF大鼠为脂肪性肝炎。电镜下观察肝脏线粒体肿胀变形,嵴排列紊乱,甚至断裂消失,说明存在肝损伤。2.血浆FFA、FINS、肝匀浆TG、血浆及肝匀浆TNF-α测定及IRI、ISI计算结果:三个模型组各指标与NC组比均有统计学意义;外周血浆FFA:NSFA高于SFA,HSF高于SFA,但无统计学差异;肝匀浆TG:SFA组显著高于NSFA组,HSF组显著高于SFA组,有统计差异;FINS、IRI:SFA组高于NSFA组,HSF组高于SFA组,但无统计学差异;ISI:SFA组低于NSFA组,HSF组低于SFA组,但无统计差异;血浆及肝匀浆TNF-α:SFA组高于NSFA组,无统计差异,HSF组显著高于SFA组,有统计差异。3.外周血浆LPS、ALT、血浆及肝匀浆MDA测定结果:除NSFA组血浆ALT与NC组比无统计差异外,其他各组指标均有统计差异;血浆ALT、LPS、肝匀浆MDA:SFA组显著高于NSFA组,HSF组显著高于SFA组,有统计学差异;血浆MDA:SFA组高于NSFA组,HSF组高于SFA组,但无统计学差异。4.肝组织及脂肪组织免疫组化TNF-α蛋白表达结果:肝组织TNF-α:NSFA组与NC组比虽有增高,但无统计差异;SFA组、HSF组在统计学上均显著高于NC组;SFA组显著高于NSFA组,HSF组显著高于SFA组,有统计学差异。脂肪组织TNF-α:NSFA组、SFA组、HSF组均显著高于NC组,有统计学差异;SFA组高于NSFA组,HSF组高于SFA组,有显著统计学意义。5.电镜结果:三个模型组肝细胞线粒体均有不同程度的肿胀、变形、嵴断裂消失等,SFA较NSFA严重,HSF较饱和组严重。6.相关分析结果:⑴IR与体重、血浆FFA、血浆及肝匀浆TNF-α间存在正相关。⑵LPS与体重、血浆ALT、FFA、血浆及肝匀浆TNF-α、MDA、肝组织及脂肪组织TNF-α蛋白间存在正相关。结论:1.肝脂肪变、脂肪性肝炎大鼠发生了胰岛素抵抗,FFA、TNF-α与胰岛素抵抗形成有关。2.肝脂肪变、脂肪性肝炎大鼠发生了内毒素血症,内毒素血症与胰岛素抵抗相关,LPS可能通过FFA、TNF-α启动IR,导致肝损伤。由此可以认为:肠源性内毒素通过促进TNF-α的释放,进而引起FFA大量增多启动IR,导致脂肪肝的形成,继而向NASH发展。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩写和中英文对照
• 前言
• 实验一 胰岛素抵抗在非酒精性脂肪肝发病中的作用
• 资料与方法
• 实验结果
• 实验结论
• 实验二 肠源性内毒素血症在非酒精性脂肪性肝病发生发展中的作用
• 资料与方法
• 实验结果
• 实验结论
• 讨论
• 参考文献
• 综述 IETM 在脂肪性肝病中的作用
• 参考文献
• 附录 非酒精性脂肪肝诊断标准
• 个人简介
• 致谢