新型氨基磷酸衍生物抑菌活性筛选及作用机制初步研究

论文摘要

本论文采用生长速率法对本中心合成的新型氨基磷酸衍生物进行抑菌活性筛选，发现了活性较好的氨取代苯并噻唑亚磷酸盐（05145、05147、05148、04172）和氨基膦酸酯（05223）。借助农药生物活性测定、显微观察和生物化学技术，测定了它们的抑菌谱和活性水平，并以小麦赤霉病原菌为对象，研究了对菌体生长量、菌丝形态及菌体内可溶性蛋白、还原糖、N-乙酰葡萄糖胺含量和几丁质酶活性的影响，为创制新型农用杀菌剂提供参考。初步研究结果如下： 四个苯并噻唑亚磷酸盐具有较广的杀菌谱，对小麦赤霉病原菌（F.graminearum）、辣椒枯萎病原菌（F. oxysporum）、水稻纹枯病原菌（T. cucumeris）、水稻稻瘟病原菌（P. oryzae）、苹果腐烂病原菌（C. mandshurica）、半夏立枯病原菌（R. solani）的EC50在15.0～148.2μg·mL-1之间。部分菌丝和分枝出现干瘪、塌陷。苯并噻唑亚磷酸盐(300μg·mL-1)处理小麦赤霉病原菌后12h内，菌体内还原糖含量明显降低，几丁质酶活性显著升高，可溶性蛋白和N-乙酰葡萄糖胺含量先升后降。推测其抑菌机理可能是通过干扰菌体糖代谢，使菌体细胞产生糖饥饿现象，刺激了几丁质酶基因的表达，不断降解菌丝顶端新合成的几丁质，影响菌丝末端细胞壁的形成，达到抑制病原菌生长目的。 氨基膦酸酯05223对小麦赤霉病原菌（F. graminearum）、辣椒枯萎病原菌（F. oxysporum）、水稻纹枯病原菌（T. cucumeris）、半夏立枯病原菌（R. solani）、水稻稻瘟病原菌（P. oryzae）、苹果腐烂病原菌（C. mandshurica）、马铃薯晚疫病原菌（P. infestans）、油菜菌核病原菌（S. sclerotiorum）、黄瓜灰霉病原菌（B.cinerea）的EC50在31.5～99.9μg·mL-1之间。菌丝变得细弱、扭曲、分枝间距缩短。菌体生长量随着药剂浓度的升高而明显降低。05223(300μg·mL-1)浸泡小麦赤霉病原菌后，菌体内电解质相对外渗率增大，24h内菌体内可溶性蛋白和还原糖含量均先升后降，但降低不明显。此外，N-乙酰葡萄糖胺含量和几丁质酶活性也无明显变化。推测其可能抑菌机理是破坏质膜选择通透性，胞内电解质和小分子内含物大量外渗，菌体细胞内环境受到破坏，影响菌体生理功能的正常进行。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 一 氨基膦酸酯生物活性研究进展
• 1.1 杀菌活性
• 1.2 抑制生物酶活性
• 1.3 抗植物病毒活性
• 1.4 抗肿瘤活性
• 1.5 植物生长调节活性
• 1.6 除草活性
• 1.7 抗氧化活性
• 1.8 破坏生物细胞膜
• 二 研究路线设计
• 2.1 研究目的和意义
• 2.2 拟解决的问题
• 2.3 研究内容
• 2.4 技术路线
• 三 实验部分
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 供试病原菌
• 3.1.2 供试化合物
• 3.1.3 商品药剂
• 3.1.4 仪器
• 3.1.5 试剂
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 化合物溶液的配制
• 3.2.2 新化合物的初筛试验
• 3.2.3 化合物抑菌谱及抑制中浓度的测定
• 3.2.4 化合物对菌体生长量影响试验
• 3.2.5 菌丝径向生长形态的显微观察
• 3.2.6 菌丝扫描电镜样品的制备
• 3.2.7 作用机理研究方法
• 四 结果与讨论
• 4.1 溶剂对菌丝生长的影响
• 4.2 新化合物初筛结果
• 4.3 苯并噻唑亚磷酸盐抑菌活性及作用机制初步研究结果
• 4.3.1 抑菌谱及皿内观察结果
• 4.3.2 对菌丝生长形态影响的扫描电镜观察结果
• 4.3.3 抑制病原菌作用机制研究结果
• 4.3.4 结论
• 4.4 氨基膦酸酯抑菌活性及作用机制初步研究结果
• 4.4.1 抑菌谱及皿内观察结果
• 4.4.2 对菌丝体生长量的抑制结果
• 4.4.3 对菌丝生长形态影响的显微观察结果
• 4.4.4 抑制病原菌作用机制研究结果
• 4.4.5 结论
• 4.5 讨论
• 五 全文结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 原创性声明
• 关于学位论文使用授权的声明