论文摘要
[研究背景]原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤,死亡率极高。研究表明原发性肝癌的发病与bax、bcl—2、P53蛋白等相关基因的表达密切相关。端粒酶对原发性肝癌的发生有促进作用。膈下逐瘀汤是清代医家王清任的《医林改错》中治疗膈下积块的一个古方。作者在长期的临床实践中应用该方加减治疗原发性肝癌,能够提高肝癌患者的生存率,改善生活质量。为了阐明该方药治疗肝癌的作用机理,本课题拟对膈下逐瘀汤加减方的抑瘤作用及其对人肝癌细胞相关基因bax、bcl—2、P53基因表达的调控及端粒酶活性的影响进行探讨。[目的]（1）探讨膈下逐瘀汤加减方对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。（2）探讨膈下逐瘀汤加减方对端粒酶活性的影响。（3）探讨膈下逐瘀汤加减方对人肝癌细胞相关癌基因表达的调控作用。[方法]以肝癌H22荷瘤小鼠为模型,观察膈下逐瘀汤加减方抗肿瘤的作用,并分别计算抑瘤率和观察瘤体组织学形态及检测甲胎蛋白（AFP）、γ—谷胺酰转移酶（r—GT）值。制备五组实验血清:不含药血清、阳性对照药物复方斑蝥胶囊含药血清、膈下逐瘀汤加减方低、中、高浓度含药血清对（用MTT法及3H-TdR掺入法）SMMC—7721增殖、细胞周期、肝癌相关基因(bax、bcl-2、P53)的表达及端粒酶活性的影响。[结果]1、膈下逐瘀汤加减方及复方斑蝥胶囊对肝癌H22荷瘤小鼠有明显抑制作用,与阴性对照组（生理盐水组）比较,具有显著性差异,P＜0.01;对瘤体组织AFP及r—GT测定结果,与阳性对照组比较,具有显著性差异,P＜0.01。2、膈下逐瘀汤加减方对SMMC-7721细胞端粒酶活性的影响,与对照组比较,膈下逐瘀汤加减方低、中、高浓度血清组及复方斑蝥血清组A值均显著下降（p＜0.05或p＜0.01）,表明膈下逐瘀汤加减方低、中、高浓度血清组及复方斑蝥胶囊血清组均可抑制SMMC-7721细胞端粒酶活性,其中膈下逐瘀汤加减方高浓度血清组对SMMC-7721细胞端粒酶活性的抑制具有非常显著的作用（p＜0.01）。3、膈下逐瘀汤加减方中浓度及高浓度血清组与复方斑蝥胶囊血清组对人肝癌细胞SMMC—7721增殖均具有显著的抑制作用,P＜0.05。膈下逐瘀汤加减方对SMMC—7721细胞周期有明显影响作用,细胞在G0—G1期的比例增高,S期的比例降低。膈下逐瘀汤加减方能调控癌基因及抑癌基因,促进细胞凋亡,均具有显著统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。[结论]1、膈下逐瘀汤加减方对肝癌H22荷瘤有明显的抑制作用。2、膈下逐瘀汤加减方能够抑制人肝癌细胞增殖,促进细胞凋亡。3、膈下逐瘀汤加减方抗肝癌的作用机制之一是通过对人肝癌细胞相关基因bax、bcl—2、P53基因表达调控作用,及对端粒酶活性的影响,促进人肝癌细胞的凋亡而起作用。
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