论文题目: 白头翁汤有效成分对内毒素诱导的RIMEC分泌功能及黏附分子表达失调的影响
论文类型: 博士论文
论文专业: 基础兽医学
作者: 段慧琴
导师: 乔健,穆祥
关键词: 白头翁汤,有效成分
文献来源: 中国农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本试验以体外培养的肠黏膜微血管内皮细胞(rat intestinal microvascular endothelial cell, RIMEC)为模型,探讨了细菌脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)对RIMEC分泌功能和黏附分子表达的影响,并观察了白头翁汤中主要有效成分(小檗碱、七叶亭、白头翁素)对LPS诱导的RIMEC分泌功能及黏附分子(Cell adhesion molecules, CAMs)表达失调的影响,以期从调节微血管内皮细胞功能方面,从细胞水平进一步揭示白头翁汤的抗炎机制。 1.利用组织块贴壁法从大鼠空肠分离培养了RIMEC,并采用第Ⅷ因子相关抗原表达和硝酸银染色以及形态学观察等方法进行了鉴定,证实RIMEC已分离培养成功,为研究RIMEC相关的病理生理反应奠定了基础。 2.本实验在成功分离培养RIMEC的基础上,观察了浓度为1μg/ml、5μg/ml和10μg/ml LPS在不同时间点对RIMEC泌功能及其CAMs表达的影响。结果LPS刺激后上清液中NO、ET-1和sICAM-1的水平及E-selectin表达均显著高于对照组(p<0.05)(NO测定采用还原酶法,ET-1、sICAM-1测定利用ELISA法,E-selectin表达检测利用免疫组化法),本试验有助于进一步揭示LPS在肠道大肠杆菌病发生发展过程中的作用机制。 3.观察了小檗碱、七叶亭、白头翁素对LPS诱导的NO、ET-1和sICAM-1的水平及E-selectin表增加的影响。结果如下: ① 10μg/mL小檗碱单独作用12h后,ET-I水平显著高于对照组(p<0.01)、NO和sICAM-1水平及E-selectin表达,与对照组比较均无显著差异;10μg/mL、5μg/mL、lμg/mL的小檗碱预孵2h后用1μg/mL LPS刺激12h,ET-I水平均显著高于对照组(p<0.01),与LPS刺激组比较均无显著差异,NO和sICAM-1水平及E-selectin表达均极显著低于LPS组(p<0.01),与对照组比较无显著差异。 ② 10μg/mL白头翁素单独作用12h后,ET-I、NO和sICAM-1水平及E-selectin表达与对照组比较均无显著差异;10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL的白头翁素预孵2h后用1μg/mL LPS刺激12h,白头翁素组NO水平均极显著低于LPS组(p<0.01),1μg/ml白头翁素组ET-1水平显著低于LPS组(p<0.05),5μg/ml,10μg/ml白头翁素组ET-1水平极显著低于LPS组(p<0.01),1μg/ml白头翁素组sICAM-1水平与LPS组比较无差异,5μg/ml、10μg/ml白头翁素组sICAM-1水平极显著低于LPS组(p<0.01)、10μg/ml白头翁素组E-selectin表达极显著低于LPS组(p<0.01)。 ③ 10μg/mL七叶亭单独作用12h后,ET-I和NO水平与对照组比较均无显著差异、sICAM-1水平显著高于对照组(p<0.05);10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL的七叶亭预孵2h后用1μg/mL LPS刺激12h,ET-I水平均显著高于对照组(p<0.01),与LPS刺激组比较均无显著差异、NO和sICAM-1水平均极显著低于LPS组(p<0.01),与对照组比较无显著差异。 本试验表明白头翁素对LPS诱导的NO、ET-1、sICAM-1分泌增加及细胞表面ICAM-1和E-selectin表达均有显著的抑制作用,小檗碱主要是下调LPS诱导的ICAM-1和E-selectin的表达,七叶亭主要是下调LPS诱导的NO分泌增加和ICAM-1表达增强。结果提示下调LPS诱导的RIMEC NO和ET-1分泌增加及ICAM-1、E-selectin表达增强可能是白头翁汤实现其抗炎作用的机制之一。
论文目录:
第一章 文献综述
1.1 内毒素概述
1.2 微血管内皮细胞培养研究进展
1.3 内皮素研究
1.4 一氧化氮及一氧化氮合酶
1.5 胞间黏附分子-1
1.6 E-选择素
1.7 中药对内毒素影响
1.8 白头翁汤及其有效成分研究
第二章 立题依据及研究意义
2.1 立题依据
2.2 试验内容及研究意义
第三章 大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的分离与培养
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 LPS对RIMEC内分泌功能及黏附分子表达的影响
4.1 材料与方法
4.2 结果
4.3 讨论
4.4 小结
第五章 小檗碱对RIMEC内分泌功能及黏附分子表达的影响
5.1 材料与方法
5.2 结果
5.3 讨论
5.4 结论
第六章 白头翁素对RIMEC内分泌功能及黏附分子表达的影响
6.1 材料与方法
6.2 结果
6.3 讨论
6.4 小结
第七章 七叶亭对RIMEC内分泌功能及黏附分子表达的影响
7.1 材料与方法
7.2 结果
7.3 讨论
7.4 小结
第八章 结论与创新
8.1 结论
8.2 创新
参考文献
致谢
个人简介
发布时间: 2005-07-18
参考文献
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