论文摘要
目的研究大黄素(Emodin)对人白血病细胞株HL-60、K562/Adr细胞增殖、凋亡的影响及Akt信号通路在其中的作用。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测大黄素对K562/Adr细胞增殖的影响;DNA片段化分析、AnnexinⅤ细胞凋亡检测、DNA倍体分析及TdT酶介导的末端缺失原位标记(TUNEL)法检测大黄素对K562/Adr细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测大黄素作用前后K562/Adr细胞c-myc、bcr/abl、mdr-1基因mRNA表达的影响; Western blotting法检测大黄素对K562/Adr细胞c-myc蛋白、bcr/abl融合蛋白P210表达的影响及大黄素作用后HL-60、K562/Adr细胞Akt信号通路蛋白表达水平的变化。结果(1)大黄素能有效抑制K562/Adr细胞的增殖,作用72小时的IC50约为20μmol/L,并能诱导其凋亡,随药物作用浓度的增加,凋亡率也渐上升。(2)大黄素下调K562/Adr细胞c-myc、bcr/abl、mdr-1基因mRNA的表达;也下调了K562/Adr细胞c-myc、P210蛋白的表达。(3)大黄素下调HL-60、K562/Adr细胞Akt信号通路蛋白Akt、p-Akt、IκB-α、p-IκB-α、p65、p-p65、mTOR、p-mTOR的表达。结论(1)大黄素能有效抑制K562/Adr细胞增殖,诱导其凋亡;并可能通过下调c-myc、bcr/abl和mdr-1的表达起作用。(2) Akt信号通路参与了大黄素抑制HL-60、K562/Adr细胞增殖、诱导凋亡的过程。
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