能量水平与糖皮质激素在肉仔鸡采食调控中的作用

论文摘要

为探讨糖皮质激素和胰岛素对肉仔鸡采食调控的影响，本研究以活体入手，用外源导入胰岛素及糖皮质激素配合日粮能量水平差异的方法，观察肉仔鸡的采食行为及体脂变化，同时分析下丘脑内食欲相关基因表达情况，为分析肉仔鸡的能量食欲调控机制提供一定的理论依据。首先，本研究通过外源导入胰岛素的方法，考察胰岛素对肉仔鸡采食量的影响。分两个试验，试验一，胰岛素注射对肉仔鸡采食量的影响。选择体重相近的雄性AA肉仔鸡72只，6日龄时即分为A、B两个组，每组36只鸡、六个处理：生理盐水、1IU/kg BW胰岛素、3IU/kg BW胰岛素、5IU/kg BW胰岛素、10IU/kg BW胰岛素、20IU/kg BW胰岛素，每个处理6个重复，每个重复1只鸡，8日龄早8:00皮下注射，A组注射前一直采用自由采食的饲喂状态，B组在注射前禁饲3h，分别在0.5h、1h、2h、3h、4h测采食量，4h后采血。试验二，急性胰岛素注射对食欲基因的影响。8日龄雄性AA肉仔鸡60只，设A对照组（saline）; B处理组（10IU insulin），禁饲3h后，早8：00对照组皮下注射saline，处理组按10IU/kg注射insulin，分别在2h;4h每个处理随机取8只鸡采血、取下丘脑。试验主要结果显示，胰岛素皮下注射对自由采食及注射前禁饲3h的肉仔鸡累积采食量均无显著性影响，对注射2h、4h后肉仔鸡下丘脑内食欲调控基因以及胰岛素受体mRNA表达也无显著性影响。而后本研究通过给予不同能量水平的日粮考察了肉仔鸡的采食量等生产性能以及能量感受基因。试验一，日粮能量水平对饲喂状态下肉仔鸡摄食、脂肪沉积的影响。0日龄AA肉仔鸡200只，自开食日龄起即分为两组进行饲喂。一组饲喂高能日粮，另一组则饲喂低能日粮。每组4个重复，每个重复25只鸡，每周记录采食量、体重。35日龄早8:00每个处理取8只鸡，采血，取下丘脑、肝脏、肾脏、脂肪（腹脂垫）；所有脂肪（腹脂、颈脂、腿脂）称重。试验主要结果表明，高能日粮使肉仔鸡的生产性能提高（耗料量及料重比降低，日增重升高）、采食量降低、脂肪沉积增加，下丘脑内AGRP表达量的下降可能是引起高能日粮饲喂肉仔鸡采食量降低的主要原因。试验二，日粮能量水平对肉仔鸡糖耐量的影响。0日龄AA肉仔鸡20只，分为为2组，采用高能/低能日粮喂至35日龄，空腹12h后，每只鸡于灌服前采血、然后灌服GLU（2.5ml/Kg BW，0.8g/ml），于0.5h、1h和2h采血。试验结果表明，高能日粮能够使肉仔鸡的糖耐量降低。试验三，空腹及再饲喂状态下不同能量日粮对肉仔鸡摄食及脂肪沉积的影响。0日龄AA肉仔鸡180只，自开食日龄起即分为两组进行饲喂。一组饲喂高能日粮，另一组则饲喂低能日粮。30日龄时每组分为8个重复，每个重复5只鸡，34日龄早8:00开始，空腹24小时，35日龄早8:00每个处理取8只鸡（每个重复1只），采血，取下丘脑、肝脏、肾脏、脂肪（腹脂垫）；所有脂肪（腹脂、颈脂、腿脂）称重，剩下的鸡分四个组（1高能的再饲喂高能；2高能的再饲喂低能3低能的再饲喂低能4低能的再饲喂高能）再饲喂3小时，11:00每个处理取10只鸡，取样同试验一。结果显示，1，空腹状态，脂肪比率、血液及基因表达同自由采食状态下的结果，进一步证明了高能日粮能够造成肉仔鸡肥胖，对血液指标无影响，但高能日粮能够降低下丘脑食欲基因AGRP的表达。2.禁饲后再饲喂不同日粮的采食量结果表明，肉仔鸡具有采食记忆性，再饲喂后的血液指标表明GLU、UA、TG、VLDL、IGF-1以及TNF-a在能量的感受中发挥一定的作用，并且高能日粮能够缓解再饲喂引起的血液指标的变化，肝脏合成能力在短期能量改变的食欲感受中发挥着重要的作用，再饲喂相同及不同能量日粮的基因表达结果共同显示下丘脑内NPY、CRH、AGRP、LEPR，肝脏内INS、11HSD，肾脏内的INSR、11HSD以及脂肪内的LEPR的表达在感受能量状态变化，调节摄食中发挥作用，并且不同能量日粮饲喂的肉仔鸡其感受能量变化的基因及反馈机制可能不同。最后本研究在日粮处理的基础上结合DEX注射的方法进一步探讨了肉仔鸡的食欲调控基因及日粮能量水平对糖皮质激素导致的食欲基因改变的作用。试验一，长期糖皮质激素处理对家禽采食选择性的影响。0日龄AA肉仔鸡80只,采用高/低能日粮喂至35日龄，然后高低能各个组都给予两种日粮，并注射DEX，即分为4个组（高能DEX高低能选择组；高能SALINE高低能选择组；低能DEX高低能选择组；低能SALINE高低能选择组）每组4个重复，每个重复5只鸡，处理时间为4天，每天记录采食量，42日龄早8:00，每个组（饲喂状态和禁饲12h两种状态下）取8只鸡，静脉窦采血，3000rpm离心10min后取血浆，冷冻保存待测。试验结果表明，在肉仔鸡中糖皮质激素可能具有促进恢复采食记忆的效应，当给予两种日粮自由选择时，主要或仅采食原本日粮，并且高能日粮能够加强这种记忆效应，高能日粮的摄入能够缓解糖皮质激素造成的血液指标的变化。试验二，急性糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡下丘脑食欲调节基因的影响。AA肉仔鸡64只,采用高/低能日粮饲喂至35日龄，分为4个组（高能DEX；高能SALINE；低能DEX；低能SALINE），每组16只鸡，35日龄早8:00注射，同时移走料槽，晚8:00再注射，第二天早8:00每个组取8只鸡，采血、所有脂肪称重（腹脂、颈脂、腿脂），取下丘脑。剩下的鸡再注射，并且再饲喂3h（定量饲喂），然后采血，取下丘脑、（肝脏、肾脏、脂肪）样品。试验结果表明，糖皮质激素对下丘脑内糖皮质激素受体以及抑食欲基因特别是CRH的刺激可能是导致肉仔鸡总采食量降低的主要原因，高能日粮能够缓解糖皮质激素引起的基因的改变。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 能量食欲的神经内分泌调控
• 1.2 胰岛素对食欲的调控作用
• 1.2.1 胰岛素的存在及分布
• 1.2.3 胰岛素的中枢调控
• 1.3 糖皮质激素对能量食欲的影响
• 1.3.1 应激
• 1.3.2 应激对采食量的影响
• 1.3.3 糖皮质激素与胰岛素及能量之间的关系
• 1.3.4 糖皮质激素活化酶
• 1.4 肥胖相关的脂肪代谢及胰岛素抵抗
• 1.4.1 瘦素与食欲及肥胖症的关系
• 1.4.2 肥胖信号（insulin/leptin）及肥胖的发生
• 1.4.3 TNF-α与肥胖引起的胰岛素抵抗有关
• 1.5 选题的目的和意义
• 2 材料和方法
• 2.1 试验动物
• 2.2 试验日粮
• 2.3 试验试剂、耗材与仪器
• 2.4 试验设计
• 2.4.1 外源胰岛素注射对肉仔鸡摄食的影响
• 2.4.2 日粮能量水平对饲喂状态下肉仔鸡摄食以及糖耐量的影响
• 2.4.3 日粮能量水平对空腹及再饲喂状态下肉仔鸡摄食的影响
• 2.4.4 糖皮质激素对肉仔鸡采食选择性的影响
• 2.4.5 糖皮质激素及日粮能量水平对肉仔鸡下丘脑食欲调节基因的影响
• 2.5 样品采集与测定
• 2.5.1 血液样品采集与测定
• 2.5.2 组织样品采集与基因表达分析
• 2.6 数据处理
• 3 结果分析
• 3.1 外源胰岛素注射对家禽摄食的影响
• 3.1.1 胰岛素梯度注射对肉仔鸡采食量及血液生化指标的影响
• 3.1.2 胰岛素注射对食欲基因的影响
• 3.2 日粮能量水平对饲喂状态下肉仔鸡摄食的影响
• 3.2.1 日粮能量水平对饲喂状态下肉仔鸡采食量、体增重及料重比的影响
• 3.2.2 不同日粮能量水平对肉仔鸡脂肪沉积的影响
• 3.2.3 不同日粮能量水平对肉仔鸡血液生化指标的影响
• 3.2.4 不同日粮能量水平对肉仔鸡食欲调控基因及肥胖相关基因相对表达量的影响
• 3.2.5 日粮能量水平对肉仔鸡糖耐量的影响
• 3.3 日粮能量水平对空腹及再饲喂状态下肉仔鸡摄食的影响
• 3.3.1 日粮能量水平对空腹及再饲喂状态下肉仔鸡脂肪沉积的影响
• 3.3.2 日粮能量水平对空腹后再饲喂状态下肉仔鸡采食量的影响
• 3.3.3 日粮能量水平对空腹及再饲喂状态下肉仔鸡血液生化指标的影响
• 3.3.4 日粮能量水平对空腹及再饲喂状态下肉仔鸡食欲调控基因及肥胖相关基因相对表达量的影响
• 3.4 试验四长期糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡采食选择性的影响
• 3.4.1 长期糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡体增重的影响
• 3.4.2 长期糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡采食选择性的影响
• 3.4.3 糖皮质激素及日粮能量水平对家禽脂肪比率的影响
• 3.4.4 糖皮质激素及日粮能量水平对家禽血液生化指标的影响
• 3.5 糖皮质激素处理对不同能量日粮饲喂肉仔鸡食欲调节基因的影响
• 3.5.1 糖皮质激素处理对不同能量日粮饲喂肉仔鸡脂肪沉积的影响
• 3.5.2 糖皮质激素处理对不同能量日粮饲喂肉仔鸡血液生化指标的影响
• 3.5.3 糖皮质激素处理对不同能量日粮饲喂肉仔鸡下丘脑食欲调节基因的影响
• 4 讨论
• 4.1 外源胰岛素注射对肉仔鸡摄食的影响
• 4.2 日粮能量水平对肉仔鸡摄食的影响
• 4.2.1 日粮能量水平对肉仔鸡生产性能、脂肪沉积及血液生化指标的影响
• 4.2.2 日粮能量水平对肉仔鸡食欲调控基因及肥胖相关基因相对表达量的影响
• 4.2.3 日粮能量水平对肉仔鸡糖耐量的影响
• 4.3 日粮能量水平对再饲喂状态下肉仔鸡摄食的影响
• 4.3.1 禁饲后再饲喂不同能量状态日粮对肉仔鸡采食量的影响
• 4.3.2 禁饲后再饲喂不同能量状态日粮对肉仔鸡血液生化指标的影响
• 4.3.3 再饲喂的日粮能量水平对肉仔鸡食欲调控基因及肥胖相关基因相对表达量的影响
• 4.4 长期糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡采食选择性的影响
• 4.4.1 长期糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡体增重及采食选择性的影响
• 4.4.2 长期糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡脂肪沉积的影响
• 4.4.3 长期糖皮质激素处理及日粮能量水平对肉仔鸡血液生化指标的影响
• 4.5 糖皮质激素处理对不同能量日粮饲喂肉仔鸡能量及食欲调节基因的影响
• 4.5.1 糖皮质激素处理对不同能量日粮饲喂肉仔鸡脂肪沉积的影响
• 4.5.2 糖皮质激素处理及对不同能量日粮饲喂肉仔鸡血液生化指标的影响
• 4.5.3 糖皮质激素处理对不同能量日粮饲喂肉仔鸡下丘脑食欲调节基因的影响
• 5 总体结论与研究展望
• 5.1 总体结论
• 5.2 创新点及研究展望
• 5.2.1 创新点
• 5.2.2 研究展望
• 参考文献
• 致谢