春石斛组培快繁技术的研究

论文摘要

春石斛（Dendrobium Nobil）是兰科石斛属多年生附生兰,因花期常常在春季而得名。因其花多、花型优美、色彩新艳,盆栽摆放别具一格,再加上管理粗放,很适合家居栽植和摆设,所以流行于日本、欧美等发达国家。但目前由于专业性培育春石斛的整体水品不是很高,关键的生产环节技术薄弱,造成春石斛繁殖系数偏低,工业化生产效率不高,许多名贵品种短缺,品质较低,且市场售价较高。因此建立和完善春石斛组培快繁技术是解决这一问题的重要途径。本试验以春石斛花后假鳞茎带节茎段为外植体诱导丛生芽,研究以丛生芽途径建立植株再生体系。主要围绕外植体灭菌、腋芽诱导、丛生芽增殖、壮苗生根、炼苗移栽等几方面进行,集中研究不同灭菌方法、不同基本培养基类型、不同激素配比和浓度、不同添加物、不同碳源等多个方面问题。试验中的培养基方案均采用正交设计,数据采用SPSS软件分析。通过试验,获得如下主要结果:1、以春石斛开花后假鳞茎带节茎段为外植体,最佳的灭菌方法是Ⅱ处理组,即假鳞茎带节茎段→自来水冲洗→洗衣粉上清液浸泡10min并用软刷刷去表面污垢→自来水冲洗30min→置于超静工作台上70%酒精浸泡20s→无菌水冲洗4次→0.1%HgCl2浸泡15min→无菌水冲洗8次→取出吸干水分并除去包叶→接种,成活率达80%。2、影响春石斛假鳞茎带节茎段诱导腋芽的主要因素是基本培养基、细胞分裂素BA和天然添加物,其次是NAA。丛生芽诱导最适宜的培养基配方为1/2 MS+BA1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+椰汁150.0mL/L+食糖30.0 g/L+琼脂7.0 g/L,pH5.4,诱导达94.47%。3、影响春石斛丛生芽增殖的主要因素是:（1）基本培养基,以1/2MS最佳;（2）细胞分裂素BA,以1.0mg/L最佳;KT以0.5 mg/L最佳;（3）生长素NAA,以1.0mg/L最佳。其次,试验中发现添加物、培养基pH值、接入茎段长度、丛植密度对丛芽增殖有显著影响。丛生芽增殖的最适宜的培养基配方是1/2MS+BA1.0mg/L+NAA1.5mg/L+KT0.5mg/L+食糖30.0g/L+琼脂6.0g/L+椰汁150.0mL/L,pH5.4。4、最适宜壮苗生根培养的培养基配方为:改良MS（以复合肥N:P:K=20:20:20代替MS中的大量元素）+BA 0.5 mg/L+NAA1.0 mg/L+香蕉泥100.0g/L+蔗糖30.0g/L+琼脂7.0g/L,pH值5.4。5、春石斛移栽时,先在室内炼苗7天,再进行移栽,试验发现水苔是较好的移栽基质,成活率高达91.67%。通过上述试验,全面研究春石斛组培快繁各阶段的主要影响因素和最佳培养基配方,筛选出最优技术参数组合,建立春石斛最优再生体系,提高丛生芽增殖系数,进而提高春石斛商业化生产效率,解决目前市场上春石斛优良品种短缺的问题,为春石斛专业化育苗提供技术支持。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1、文献综述
• 1.1 兰花组织培养的研究概况
• 1.1.1 原球茎的来源及增殖
• 1.1.2 培养基及外界条件的研究
• 1.2 春石斛概述
• 1.2.1 春石斛的形态特征和习性
• 1.2.2 春石斛组织培养的研究概况
• 2、引言
• 3、试验材料与方法
• 3.1 供试材料
• 3.2 技术路线
• 3.3 初代培养方案设计
• 3.3.1 外植体无菌体系的建立
• 3.3.2 筛选假鳞茎带节茎段诱导腋芽试验方案
• 3.4 丛生芽继代增殖培养方案设计
• 3.5 生根壮苗培养方案设计
• 3.6 春石斛试管苗驯化及移栽技术研究
• 3.7 数据计算方法与分析工具
• 4、结果与分析
• 4.1 初代培养
• 4.1.1 外植体无菌体系的建立
• 4.1.2 筛选茎假鳞茎带节茎段诱导丛生芽培养
• 4.2 丛生芽继代增殖培养
• 4.2.1 基本培养基、BA、NAA、KT对丛生芽增殖的影响
• 4.2.2 添加物对丛生芽增殖的影响
• 4.2.3 碳源对丛生芽增殖的影响
• 4.2.4 培养基pH对丛生芽增殖的影响
• 4.2.5 琼脂浓度对丛生芽增殖的影响
• 4.2.6 丛植密度对丛生芽增殖的影响
• 4.2.7 接入茎段长度对丛生芽增殖的影响
• 4.3 生根与壮苗培养
• 4.3.1 生根培养
• 4.3.2 壮苗培养
• 4.4 移栽基质对试管苗移栽成活的影响
• 5、结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.2 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 附图