论文摘要
本试验采用常规方法分离大豆根腐病病原菌,并从大豆根际中筛选大豆根腐病菌拮抗菌,利用磷脂脂肪酸法确定大豆根腐病菌拮抗菌的分类地位,然后利用基于16S rDNA特异性扩增的DGGE技术,结合传统方法,来研究施用种衣剂后大豆根际细菌遗传多样性和非靶标有益微生物中的主要生防菌随大豆生育期而消长变化的规律,得到了不同处理条件下的根际细菌DNA序列多样性之间的差异,分析了种衣剂对大豆根际细菌多样性及对根腐病生防菌的影响强度和影响的持续性,为大豆根际其他功能微生物的进一步研究奠定了基础。本研究获得的主要结论如下:1.大豆根际具有抑菌效果的菌株占分离菌株总数的25%,并且细菌的抑菌效果较放线菌的抑菌效果好。由鉴定结果可知,8株生防细菌中主要有枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),荧光假单孢菌(Pseudomonas spp.)等,放线菌中主要起生防作用的是链霉菌(Streptomycesspp.)。2.宁南霉素、咯菌腈、甲霜灵和多克福对大豆根际细菌多样性均产生影响。试验前期,除低浓度甲霜灵外其他处理组均对大豆根际细菌产生较强的抑制作用,甲霜灵高浓度和常规浓度的抑制作用较小。试验中期,不同种衣剂对大豆根际细菌多样性的影响强度不同,3种浓度的多克福对根际细菌多样性的影响较小,接近对照水平,其他3种种衣剂至少有2种浓度对根际细菌种群结构在遗传上的影响一致。后期,宁南霉素处理组最先恢复到对照水平,然后依次是多克福和甲霜灵,咯菌腈。3.试验前期,4种种衣剂均抑制生防菌Pseudomonas sp.的生长,之后,各种种衣剂对该种生防菌稍有促进作用,最后恢复到对照水平。4种种衣剂对生防菌Bacillus sp.的影响不大,但甲霜灵在试验前期对该种生防菌具有促进作用。4.4种种衣剂在常规使用浓度下,多克福和甲霜灵药效持续到第75d。施用宁南霉素后的第61d、68d、75d、82d的土壤细菌在遗传上相近,表明宁南霉素处理从第61d开始恢复到正常水平。施用咯菌腈后的第68d和75d的根际细菌种群在遗传上较近,施药后期对大豆根际细菌的影响趋于稳定,影响较小,直至第82d无变化。