波里马细胞质雄性不育两用系DH群体的遗传多样性分析和研究

论文摘要

油菜杂种优势的利用一直是提高油菜产量的重要途径,而雄性不育是利用杂种优势的主要途径,所以不育系和恢复系的选育在雄性不育利用中占据着异常重要的地位。自1972年傅廷栋发现波里马细胞质雄性不育系（Pol CMS）以来,它已是目前国际上最有使用价值的细胞质雄性不育类型。但要想继续充分利用PolCMS,大幅度提高甘蓝型油菜杂交种的产量、品质以及抗病、抗虫能力,选育各项经济性状和农艺性状优良、配合力高的不育系已经成为应用Pol CMS进行油菜杂交育种的关键。杨光圣等（1990）在甘蓝型油菜中发现温敏型波里马细胞质雄性不育两用系,这一发现为波里马细胞质雄性不育的利用开辟更加广阔的应用前景。本研究以一个优质的甘蓝型油菜波里马温敏型细胞质雄性不育两用系育115为材料,研究利用小孢子培养技术选育纯化甘蓝型油菜温敏型波里马细胞质雄性不育两用系的可行性。在试验中,我们用40对SSR引物和64对AFLP引物对74份材料（72份DH系材料和2份对照）进行遗传多态性分析,总共得到236条多态型条带,相似系数变异范围在0.57-0.98之间。以1和0将实验结果录入Office Excel中,然后利用生物软件NTSYSpc2.1e对数据进行聚类分析。如果以0.68作为分类阈值,则该群体可以划分为3个遗传背景有差异的大群体或株系。DH系的株系之间存在一定的遗传多样性,其中115-2-1、115-3、115-6-1、115-11-2、115-23-1、115-92-1、115-94-2、115-95-1、115-99-3、115-102-1、115-107-1这11个DH株系的表现不错,结合育性调查和品质分析,可以从中挑选出优良的波里马细胞质雄性不育系用于配制杂交油菜的亲本组合。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 缩略语表
• 1 文献综述
• 1.1 油菜在生产、生活中的重要地位
• 1.2 油菜的起源与世界分布
• 1.3 我国的甘蓝型杂交油菜育种的研究
• 1.3.1 油菜杂种优势利用途径
• 1.3.1.1 细胞核雄性不育（GMS）
• 1.3.1.2 细胞质雄性不育（CMS）
• 1.3.1.3 细胞核+细胞质雄性不育
• 1.3.1.4 自交不亲和
• 1.3.1.5 化学杀雄
• 1.3.1.6 生态型雄性不育（TCMS）
• 1.3.1.7 其它利用途径
• 1.3.2 油菜育种过程中生物技术的运用
• 1.3.2.1 小孢子培养技术在油菜育种中的运用
• 1.3.2.2 原生质体融合技术的应用
• 1.3.2.3 转基因技术的应用
• 1.3.2.4 分子标记技术在油菜育种中的应用
• 1.3.3 油菜遗传多样性的研究方法
• 1.3.3.1 利用农艺性状进行遗传多样性分析
• 1.3.3.2 利用同工酶标记进行遗传多样性分析
• 1.3.3.3 利用蛋白质标记进行遗传多样性分析
• 1.3.3.4 利用分子标记进行遗传多样性分析
• 1.4.本研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 小孢子的培养与田间倍性鉴定
• 2.3 品质分析
• 2.4 田间取样和DNA的提取
• 2.5 SSR分子标记和数据分析
• 2.5.1 PCR反应
• 2.5.2 扩增产物的电泳检测
• 2.6 AFLP分子标记和数据分析
• 2.6.1 总DNA的酶切和连接处理
• 2.6.2 预扩增反应
• 2.6.3 选择性扩增反应
• 2.6.4 扩增产物的电泳检测
• 2.7 育性调查
• 3 结果与分析
• 3.1 DH材料的成苗以及加倍情况
• 3.2 DH系的育性调查
• 3.3 DH系的品质分析
• 3.4 72份DH材料和2对照亲本分子标记扩增及聚类结果
• 4.讨论
• 4.1 利用分子标记技术对DH群体进行遗传多样性分析的研究
• 4.2 关于选育优良不育系用于构建两系杂交体系的探讨
• 参考文献
• 附录1:GENOMIC DNA EXTRACTION IN BRASSICA NAPUS（CTAB MTHOD）
• 附录2:AFLP标记在74份材料中的扩增效果图版
• 致谢