灯盏乙素和灯盏花素对心脑缺血性疾病的保护作用

论文摘要

脑血管病、心脏病和恶性肿瘤是目前我国死亡率居前三位的疾病。在不断增加的老年人群中,心脑血管病已经是造成死亡和致残的首要病因。经流行病学统计,我国因心脑血管疾病死亡者占总死亡人口的百分比,已由1957年的12.07%上升到2001年的42.6%。每年死于心脑血管疾病者达200万,另有部分患者虽经抢救而幸存,但多数留下残疾,生活不能自理,给亲属及社会造成严重负担。心脑血管疾病已经是危害人类健康的主要疾病,更是目前和未来20年内人类致死、致残的“头号杀手”。缺血性疾病如脑梗死、心肌梗死等是常见的心脑血管疾病,药物一直是防治缺血性疾病的最主要手段之一,其中不乏一些中药。特别是对于脑血管病后遗症的治疗,中药占据了很大比例。随着中药现代化进程的加快,中药有效成分及单体防治缺血性心脑血管疾病也日益受到关注。灯盏花素（Breviscapine）是从菊科飞蓬属植物短亭飞蓬[Erigeron breviscapus （vant） Hand Mass]灯盏细辛中提炼的黄酮类混合物,具有抗缺血损伤、抗血小板聚集、改善器官血流动力学和微循环等多方面作用。在心脑血管疾病上的应用也比较广泛,目前临床应用的多为灯盏花素混合物制剂,研究表明在灯盏花素混合物中有9种单体物质,包括黄芩黄素、东莨菪内酯、柚皮素、山奈黄素、芹菜（苷）配基、黄色黄素、咖啡酸、原儿茶酸和灯盏乙素等,其中灯盏乙素的含量占到约90%以上。灯盏乙素单体是否是灯盏花素混合物中药理活性成分?对缺血性疾病的疗效是否比灯盏花素具有更好的量效曲线关系?目前尚未见报道,我们认为这个问题很重要,很值得研究。我们旨在通过对动物模型的药效学的研究,证明灯盏花素和灯盏花乙素单体对心脑血管缺血性疾病（心肌梗死和脑梗塞）的有效性。并希望通过对比两药的量效关系,证明灯盏乙素单体是灯盏花素中的有效药理活性成分。方法1.急性毒性试验。昆明种小鼠,体重18—22克,雌雄各半。腹腔注射给药,观察小白鼠的活动情况,时间为14天;计录各组小鼠的死亡数,并观察和分析死亡原因。寇氏法计算2个药物的LD50。2.灯盏乙素和灯盏花素对冠脉结扎大鼠心肌梗死面积的影响6周龄雄性SD大鼠,手术结扎冠状动脉左前降支,造成急性心肌梗死模型,腹腔注射不同剂量灯盏乙素和灯盏花素,4小时后处死动物,取出心脏称重,置0.1%NBT溶液中染色,最终观察心肌梗死面积,计算每个药物对心肌梗死面积影响的量效曲线。3.灯盏花素和灯盏乙素对麻醉犬急性心肌梗死的保护作用。10-12公斤杂种犬分3组（溶剂对照组,灯盏花素组和灯盏乙素组）。采用犬冠脉结扎后所导致的心肌梗死模型,通过测定不同时间点心电图ST段总和（∑ST）心外膜电图心肌缺血范围（NST）,以及对心肌梗死范围的定量组织学检测,研究了灯盏花素和灯盏乙素对心肌缺血程度和缺血范围的影响及区别。4.灯盏乙素对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡等的影响。6周龄雄性SD大鼠,手术结扎冠状动脉左前降支,造成急性心肌梗死模型,术后以50mg/kg灯盏乙素和对5%葡萄糖腹腔注射。24小时后处死动物取出心脏,取梗死区域,生理盐水冲洗,置入标本包埋盒内,中性甲醛保存。TUNEL法进行细胞凋亡检测,并计算凋亡指数（apoptosis index）5.灯盏花素和灯盏乙素对大脑中动脉阻断大鼠脑梗死面积的影响。8周龄雄性SD大鼠,手术行大脑中动脉栓塞,舌下静脉注射不同剂量灯盏乙素和灯盏花素,回笼饲养,注意术后保温。24小时后处死动物,取出大脑,2%TTC染色,用计算机化图像分析系统计算脑梗死面积,做出每个药物对脑梗死面积影响的量效曲线。结果1.灯盏乙素的LD50是2402mg/kg,灯盏花素的LD50是2682mg/kg;2.在AMI大鼠模型中,LAD结扎4小时后梗死区重占左心室重比值,灯盏乙素（50mg/kg）组明显低于对照组（18.9 vs 24.9 %,P<0.01 ）;而灯盏花素组不明显（29.4 vs 27.7 %）。3.在急性心肌梗死犬模型中,50mg/kg灯盏乙素能够降低LAD结扎后犬心外膜电图抬高的∑ST段。4.灯盏乙素（50mg/kg）能明显抑制急性心肌梗死大鼠梗死区心肌细胞的凋亡,凋亡指数低于对照组（34.7 vs 41.8 %,P<0.05）。5.在MCA栓塞大鼠模型中,MCA栓塞24小时后,灯盏乙素和灯盏花素均可减少梗死面积,随着剂量增加,效果增强。在灯盏乙素组（5、15、50mg/kg）,梗死区面积与危险区面积比值分别为（ 43.7 vs 40.3 vs 33.2 %）;而灯盏花素组（5、15、50mg/kg）,此比值分别为（ 44.0 vs 43.2 vs 42.2 %）。结论1.灯盏乙素单体能够降低心肌梗死面积,抑制梗死区心肌细胞的凋亡,剂量为50mg/kg时最明显,而灯盏花素对降低心肌梗死面积作用不明显。2.灯盏乙素和灯盏花素均可以减轻脑梗死的面积;灯盏乙素单体随着药物剂量的增加,作用越明显;而灯盏花素随着剂量的增加,作用没有明显增强。3.灯盏花素和灯盏乙素对脑缺血效果优于心肌缺血。4.灯盏乙素单体是灯盏花素的主要药理活性成分,并比灯盏花素具有更好的量效关系。

论文目录

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• 前言
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 附录
• 致谢