论文摘要
目的:研究中药单体补骨脂素在OB-OC共育体系中对成骨细胞(Osteoblast,OB)增殖、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性的影响,以及补骨脂素对OB中白细胞介素-11(Interleukin-11,IL-11)mRNA表达的影响,探讨补骨脂素是否具有防治骨质疏松症(Osteoporosis,OP)的作用及其可能的作用途径。方法:1.取1d的龄SD大鼠分离OB,取5d龄SD大鼠分离破骨细胞(Osteoclast,OC),建立OB-OC共育体系。2.用MTT法检测各药物浓度对OB-OC共育体系中OB增殖的影响,确定最佳药物浓度。3.对硝基苯磷酸盐法(P-nitrophenyl phosphate,PNPP)检测OB ALP活性;茜素红染色法观察OB矿化情况。4.RT-PCR法检测补骨脂素对IL-11mRNA表达的影响。结果:1.经考马斯亮蓝法检测蛋白质弥散情况,显示,在8h内,蛋白质可以从OB室经半透膜弥散到OC室。2.OB与OC共育后,OD值较单独培养时明显提高(P<0.05)。3.OB-OC共育体系中OB ALP活性高于单独培养的OB(P<0.05),矿化结节数明显高于单独培养的OB(P<0.05)。4.补骨脂素的浓度为5μmol/L时,OB的OD值最大(P<0.05),ALP活性高于对照组(P<0.05)。5.补骨脂素干预的OB-OC共育体系中OB的IL-11mRNA的表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:1.体外OB在OB-OC共育体系中的增殖、分化、矿化能力均较强。2.补骨脂素的浓度为5μmol/L时,其明显促进OB增殖,提高ALP活性。3.补骨脂素提高共育体系中OB的IL-11mRNA的表达水平。