论文摘要
宫颈癌是全球发病率居第二位的女性恶性肿瘤,居我国女性恶性肿瘤之首,本课题组前期对早期宫颈鳞癌进行了cDNA基因芯片筛查,结果表明IL-8在有淋巴结转移宫颈癌组织中的表达较无淋巴结转移宫颈癌组织高3.4倍,并经体外实验证明IL-8通过促进宫颈癌细胞的增生、迁移、与内皮细胞的黏附作用及促进血管生成等机制促进宫颈癌的浸润转移;还利用IL-8 shRNA使Caski细胞株中的IL-8基因表达沉默,证实IL-8 shRNA能有效抑制宫颈癌细胞增生、趋化及粘附。为了进一步阐明IL-8基因在宫颈癌发生发展中的作用,本实验建立与IL-8相关的荷人宫颈癌裸鼠模型,在裸鼠体内观察IL-8对宫颈癌裸鼠移植瘤生长以及淋巴转移的影响;并应用IL-8单克隆抗体及IL-8 shRNA进行治疗,观察其对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。研究目的:（1）建立IL-8相关的荷人宫颈癌裸鼠模型,在裸鼠体内研究IL-8对宫颈癌裸鼠移植瘤生长以及淋巴转移的影响,为临床探讨宫颈癌浸润转移机制提供理论依据。（2）在裸鼠体内应用IL-8单克隆抗体及IL-8shRNA,观察其对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用,为临床基因靶向治疗宫颈癌提供理论依据。方法:（1）将高表达IL-8的pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞株、CaSki细胞株和沉默IL-8的PGenesil-1-IL-8shRNA-Caski细胞株接种到裸鼠皮下,建立IL-8相关的荷人宫颈癌裸鼠模型。（2）观察不同细胞接种后在裸鼠皮下的成瘤情况,定期测量肿瘤的体积大小,绘制移植瘤生长曲线,裸鼠自然死亡后,称瘤重,计算促瘤率或抑瘤率及生存时间。（3）应用HE染色观察移植瘤及淋巴结的细胞形态学变化;用RT-PCR,ELISA,TUNEL,免疫组化等方法进一步检测裸鼠移植瘤组织和血清中IL-8的表达。（4）用IL-8单克隆中和抗体对高表达IL-8的两种荷人宫颈癌裸鼠模型进行治疗,接种后第4天开始分高、中、低三个剂量组腹腔注射IL-8单克隆抗体,观察其抑瘤效果,采用前述同样的方法绘制移植瘤生长曲线、计算抑瘤率、HE染色观察细胞形态学变化及检测裸鼠移植瘤组织和血清中IL-8的表达。结果:（1）成功建立了IL-8相关的荷人宫颈癌裸鼠移植瘤模型;（2）裸鼠成瘤实验发现,高表达IL-8的pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞成瘤能力明显增强,生存时间明显缩短,肿瘤的体积与重量明显高于对照组,促瘤率为84.5%;实验组腋下淋巴结增大,HE染色发现细胞体积大,核浆比例明显失调,核深染,对照组细胞形态学无明显改变;RT-PCR、免疫组化、ELISA结果显示裸鼠移植瘤及血清中IL-8表达与对照组相比明显增高。（3）沉默IL-8的PGenesil-1-IL-8shRNA-Caski细胞成瘤能力明显降低,生存时间明显延长,肿瘤的体积与重量明显低于对照组,抑瘤率为71.0%;HE染色发现细胞分裂相少见,可见大量的细胞坏死灶;TUNEL显示凋亡细胞明显增多;RT-PCR、免疫组化、ELISA结果显示裸鼠移植瘤及血清中IL-8表达与对照组相比明显降低。（4） IL-8单克隆抗体治疗后的CaSki细胞和pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞成瘤能力明显降低,生存时间延长,肿瘤体积与重量明显低于对照组,抑瘤率分别为76.6%和72.0%;HE染色证明实验组肿瘤细胞生长不佳,细胞体积较小,细胞分裂相少见,可见大量细胞坏死灶;瘤组织剖面可见较多坏死区域;TUNEL荧光显示凋亡细胞明显增多;RT-PCR、免疫组化、ELISA结果发现裸鼠移植瘤及血清中IL-8表达与对照组相比明显降低。结论:（1）裸鼠体内实验表明IL-8基因能促进宫颈癌裸鼠移植瘤的致瘤作用及淋巴结转移;（2）沉默CaSki细胞中IL-8基因能明显抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长;（3）IL-8单克隆抗体能明显抑制高表达IL-8的荷人宫颈癌裸鼠移植瘤生长,且随着IL-8单克隆抗体剂量的增加,肿瘤体积也随之减小,证明抗肿瘤疗效与注射的抗体剂量之间存在量-效关系,有望成为宫颈癌基因治疗的有效策略之一。
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- [3].胡椒碱抑制脂多糖活化的结肠腺癌细胞炎症因子IL-8的表达[J]. 华中科技大学学报(医学版) 2016(01)
- [4].非小细胞肺癌中IL-8与MCP-1的表达及其临床意义[J]. 现代肿瘤医学 2016(03)
- [5].IL-8在肝源性糖尿病中的表达及意义[J]. 福建医药杂志 2016(05)
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- [7].泛发性脓疱型银屑病患者皮损处IL-8及GM-CSF的检测[J]. 中国麻风皮肤病杂志 2011(12)
- [8].陕西人群中IL-8、IL-10单核苷酸基因多态性与结直肠癌的易感性[J]. 世界华人消化杂志 2015(07)
- [9].血清IL-8在过敏性紫癜的表达及意义[J]. 现代生物医学进展 2015(11)
- [10].细菌性肺炎患者IL-6及IL-8及C反应蛋白的测定及其意义[J]. 中国微生态学杂志 2015(06)
- [11].IL-6、IL-8检验在肺炎支原体感染诊治中的效果分析[J]. 中国保健营养 2012(12)
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- [13].应用种植体修复后慢性牙周炎老年患者的IL-2、IL-8水平变化及疗效分析[J]. 贵州医药 2016(11)
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- [15].细胞侵袭相关IL-8及IL-18在骨肉瘤患者血清水平及其临床意义[J]. 右江医学 2016(04)
- [16].严重颅脑创伤后误吸成分对血浆及肺泡液中IL-8水平的影响[J]. 江苏医药 2013(23)
- [17].IL-8与结直肠癌[J]. 大连医科大学学报 2014(01)
- [18].IL-8及其受体与子宫内膜异位症[J]. 中国卫生标准管理 2014(07)
- [19].蒙药枸杞子-7对子宫内膜异位症大鼠血清IL-8含量的影响[J]. 北方药学 2013(01)
- [20].血清IL-2、IL-6和IL-8在克罗恩病早期诊断中的意义[J]. 中国实用医药 2013(16)
- [21].子宫内膜异位症患者腹腔液中瘦素及IL-8表达的临床意义[J]. 实用妇产科杂志 2013(09)
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- [23].肺炎支原体感染患儿IL-6、IL-8临床检验结果探讨[J]. 中国当代医药 2012(02)
- [24].妊娠期高血压疾病患者血清IL-2和IL-8水平及临床意义[J]. 内蒙古医学杂志 2012(06)
- [25].血管紧张素Ⅱ诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞表达IL-6和IL-8[J]. 西部医学 2011(01)
- [26].过敏性紫癜患儿治疗前后IL-8的变化及临床意义[J]. 中国中医药现代远程教育 2011(05)
- [27].血清IL-8水平测定在子宫内膜异位症诊断中的价值[J]. 免疫学杂志 2011(06)
- [28].肺炎支原体感染患儿IL-6、IL-8的临床检验结果分析[J]. 中国现代医生 2011(16)
- [29].巨细胞病毒肝炎患儿血清IL-6、IL-8水平检测的意义[J]. 医药论坛杂志 2011(15)
- [30].曲美他嗪对非体外循环冠脉搭桥术患者IL-6、IL-8的影响[J]. 中国医药导刊 2011(04)