氡与吸烟联合致肺癌机理研究

论文摘要

目的意义：通过建立α粒子和CSC（烟草凝集物）联合暴露的细胞模型，观察在体外培养条件下α粒子和CSC联合作用BEP2D细胞所导致的细胞毒性和慢性转化效应，探讨二者作用顺序的差异，为环境氡与吸烟的联合危害评价提供理论依据。材料与方法：永生化的人支气管上皮细胞（BEP2D），分正常组、单纯α粒子照射、单纯CSC染毒、CSC染毒后α粒子照射和α粒子照射后CSC染毒，测定细胞毒性和恶性转化效应相关指标。实验结果：（1）细胞存活曲线结果，单纯CSC染毒或α粒子照射BEP2D细胞的平均致死剂分别为3μg／ml和0.7Gy。（2）单纯α照射或CSC染毒对细胞内活性氧水平（ROS）、细胞膜损伤（LDH）、线粒体损伤（NAO）、脂质过氧化损伤（MDA）、超氧化物岐化酶活力（SOD）、硒谷胱甘酞过氧化物酶活力（SeGPx）、凋亡率、DNA损伤参数及8-羟基脱氧鸟菅（8-OH-dG）的产生均有显著影响，呈现剂量依赖关系。二者联合作用对细胞的损伤作用更为严重。（3）联合作用中，部分指标（如ROS、NAO、MDA、SOD、SeGPx及凋亡率等）先CSC染毒后α粒子照射，均低于期望值，且低剂量更明显，而先α粒子照射后CSC染毒始终呈现协同效应，提示两者作用的先后顺序存在效应上的差异，但其它指标的协同效应未观察到不同作用顺序的差别。（4）α粒子、CSC单独或联合作用BEP2D细胞，连续培养至35代后，进行细胞生物学特性分析，结果表明，先α粒子照射后CSC染毒组，BEP2D细胞失去了接触抑制，体外生存能力明显增强，获得了锚着独立生长能力；细胞周期处于失控状态（G0／G1期细胞比例明显减少，G2／M期细胞比例增加，S期明显缩短等），自发凋亡率增高，呈现恶性转化特征，而其他处理组均未观察到与正常细胞有显著差异的变化。结论：α粒子和CSC联合损伤效应具有明确的协同性，并与两者作用的先后顺序有关，先α粒子照射后CSC染毒比先CSC染毒后α粒子照射组具有更高的致癌危险性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 前言
• 第一部分 α粒子和CSC对BEP2D细胞的损伤效应
• 一、引言
• 二、实验材料和方法
• 三、实验结果
• 四、讨论
• 五、小结
• 第二部分 α粒子与CSC诱发BEP2D细胞转化及机理
• 一、引言
• 二、材料和方法
• 三、实验结果
• 四、讨论
• 五、小结
• 全文结论
• 参考文献
• 附录
• 一、缩略词表
• 二、论文图表目录
• 三、综述
• 四、已发表文章
• 致谢