论文摘要
哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是一种革兰氏阴性的海洋细菌,广泛分布于海洋环境及海洋生物,能引起海水鱼类及其它养殖动物发病,是世界上许多国家和地区养殖对虾和鱼类的致病菌,也是我国海产经济鱼类弧菌病的主要病原菌之一,给海水养殖业造成了巨大的经济损失。哈维氏弧菌的胞外蛋白酶、磷酯酶、溶血素、Ⅲ型分泌系统、密度感应系统等与其致病性密切相关。目前国内对细菌病防治仍然主要靠化学药物及抗生素,由此带来的环境污染、药物残留及细菌耐药性现象日益明显。疫苗防治方法由于安全无污染,是未来疾病防治的首选措施。微生物常遇到环境中较多的活性氧自由基的损害。硫氧还蛋白系统包括硫氧还蛋白、硫氧还蛋白还原酶和NADPH,是一个广泛分布的NADPH依赖性二硫化物还原酶系统,广泛地存在于真核生物和原核生物中。硫氧还蛋白系统与体内细胞氧化还原反应、核酸代谢、细胞生长密切相关。其中,硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase, TrxR)是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶。主要功能是催化NADPH将小分子蛋白硫氧还蛋白上的二硫键(-S-S)还原成(-SH)2的反应,维持Trx的还原型,可以维持细胞自由基产生和清除之间的平衡,在微生物适应环境及细菌致病性方面发挥重要作用。本文从致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi) SF1基因组中扩增获得含硫氧还蛋白还原酶基因的1133 bp目的片段,连接至载体pMD19-T Simple,测序结果表明,目的片段含有960 bp的硫氧还蛋白还原酶基因阅读框,编码319个氨基酸残基的蛋白质。BLAST分析显示氨基酸序列与哈维氏弧菌、溶藻胶弧菌、副溶血弧菌、灿烂弧菌、弗氏弧菌的硫氧还蛋白还原酶蛋白序列相似性为分别为99%、98%、96%、94%、92%,该基因被命名为trxR。构建表达质粒pET-28a(+)/trxR后转化至大肠杆菌(E.coli) BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示重组蛋白分子量为34 kDa。用Ni琼脂糖亲和柱分离得到纯化的重组蛋白,将该蛋白以50μg/尾的剂量肌肉注射免疫大菱鲆,直接ELISA法检测了1-4周特异性抗体的效价。结果表明,1-4周内特异性抗体效价持续升高,达到log27.0。免疫4周后用哈维氏弧菌SF1进行人工感染,对照组的死亡率为100%,免疫组的死亡率为25%,免疫保护率为75%。表明哈维氏弧菌TrxR蛋白具有良好的免疫原性,可作为亚单位疫苗用于哈维氏弧菌病的免疫预防。
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- [1].硫氧还蛋白与心血管疾病的研究进展[J]. 中国循证心血管医学杂志 2017(05)
- [2].硫氧还蛋白在凋亡途径中的作用机制[J]. 中国比较医学杂志 2012(11)
- [3].脂联素和人胞质硫氧还蛋白间的相互抑制关系(英文)[J]. Science Bulletin 2016(19)
- [4].硫氧还蛋白及其相关蛋白的研究进展[J]. 海洋科学 2008(06)
- [5].维拉帕米通过下调硫氧还蛋白互作蛋白的表达抑制丙型肝炎病毒感染[J]. 第二军医大学学报 2017(05)
- [6].金龙胶囊对晚期原发性肝癌患者硫氧还蛋白还原酶水平的影响[J]. 湖北中医药大学学报 2015(02)
- [7].硫氧还蛋白还原酶研究进展[J]. 国外医学(医学地理分册) 2012(01)
- [8].硫氧还蛋白还原酶与循环系统疾病[J]. 实用临床医学 2013(02)
- [9].硫氧还蛋白2的研究进展[J]. 医学综述 2012(05)
- [10].硫氧还蛋白生物学功能与人类疾病的关系[J]. 当代医学 2019(17)
- [11].硫氧还蛋白-1与衰老的研究进展[J]. 临床与病理杂志 2016(04)
- [12].不同程度溶血对硫氧还蛋白还原酶活性检测的影响[J]. 检验医学 2013(11)
- [13].硫氧还蛋白结合蛋白-2在糖和脂代谢中的作用[J]. 生命的化学 2010(01)
- [14].硫氧还蛋白的研究进展[J]. 企业技术开发 2019(02)
- [15].硫氧还蛋白还原酶2在恶性肿瘤中的研究进展[J]. 实用肿瘤学杂志 2018(02)
- [16].硫氧还蛋白在心肌疾病及其能量代谢中的作用[J]. 黑龙江畜牧兽医 2017(17)
- [17].硫氧还蛋白还原酶及其抑制剂的研究进展[J]. 中国药科大学学报 2016(05)
- [18].硫氧还蛋白还原酶的生理学功能研究进展[J]. 现代医药卫生 2012(16)
- [19].硫氧还蛋白-1对代谢型谷氨酸受体1a毒性的抑制作用[J]. 疾病监测 2011(03)
- [20].硫氧还蛋白结合蛋白-2的表观遗传学修饰及其与肿瘤的相关性[J]. 生命的化学 2010(02)
- [21].血浆硫氧还蛋白还原酶在肺癌中表达的初步研究[J]. 医学理论与实践 2016(07)
- [22].硫氧还蛋白相互作用蛋白和硫氧还蛋白还原酶1在乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义[J]. 中国医刊 2017(10)
- [23].原虫硫氧还蛋白还原酶研究进展[J]. 动物医学进展 2016(03)
- [24].非酒精性脂肪性肝病患者血清硫氧还蛋白、铁蛋白、瘦素水平测定[J]. 免疫学杂志 2008(06)
- [25].硫氧还蛋白还原酶结构分形研究[J]. 北京大学学报(自然科学版) 2008(02)
- [26].硫氧还蛋白互作蛋白在乳腺癌中的研究进展[J]. 医学研究杂志 2019(11)
- [27].硫氧还蛋白还原酶在肺癌诊断、治疗及预警中的作用[J]. 中外女性健康研究 2017(07)
- [28].硫氧还蛋白及其与肿瘤的关系[J]. 中国兽医杂志 2011(01)
- [29].硫氧还蛋白在脓毒症中的作用研究进展[J]. 中国急救医学 2019(09)
- [30].硫氧还蛋白还原酶活性在肺癌患者化疗前后的变化[J]. 中南医学科学杂志 2016(04)
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