唾液酸寡糖—壳聚糖复合物的制备及其生物活性的研究

论文摘要

唾液酸是9-碳单糖的衍生物,在生物体内,能与不同分子量的寡糖结合形成唾液酸寡糖。唾液酸寡糖结合于糖链非还原末端,形成负电性分子,是流感病毒及其它病毒的结合位点。壳聚糖是自然界中唯一的碱性多糖,具有多种生物活性,但其溶解性能差的特点限制了其在医药临床的应用。在研究中将壳聚糖和唾液酸寡糖结合,既解决了壳聚糖水溶性问题又发挥他们二者生物活性的协同作用,对研究与开发新型抗病毒药物具有重要的意义。取得试验结果如下:1.唾液酸寡糖-壳聚糖复合物的制备以壳聚糖为主链、唾液酸寡糖为侧链进行。唾液酸寡糖在酸性条件下,以水为介质与壳聚糖进行酸碱反应,合成了有良好水溶性的唾液酸寡糖-壳聚糖复合物。优化反应条件为:壳聚糖、唾液酸寡糖质量之比为3︰50,温度控制在室温,反应时间为48小时,所得唾液酸寡糖-壳聚糖复合物的接枝率、接枝效率、产率分别为50%、3%、8.5%。2.进行体外抑菌试验,结果表明,唾液酸寡糖-壳聚糖复合物对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、绿脓杆菌、鸡沙门氏菌、鸡大肠杆菌均有不同程度的抑菌作用,但与对照组比较差异均不显著,对猪大肠杆菌无抑菌作用。不同分子量的壳聚糖的抑菌效果均不同,分子量越小抑菌效果越显著。3.抗禽流感病毒试验,结果表明,在相同条件下,样品2对禽流感H5亚型和样品1对H7、H9亚型抗原引起的血凝抑制效果最佳。但试验结果也提示,当药物浓度较高时,其对禽流感H5、H7、H9亚型抗原引起的血凝抑制效果影响较弱。4.对清除自由基、T、B淋巴细胞和巨噬细胞、IL-2、IL-6进行免疫试验,结果表明:当唾液酸寡糖-壳聚糖复合物给药量为3 mg/kg时,其对正常小鼠能显著地抑制羟自由基活性、增强超氧化物歧化酶的活力,增强小鼠T、B淋巴细胞的增值能力,血清中IL-6的水平降低,与对照组相比较差异显著,丙二醛含量的降低,巨噬细胞的吞噬能力增强,血清中IL-2的水平升高,与对照组相比较差异极显著。结论:唾液酸寡糖-壳聚糖复合物水溶性良好,其在免疫、抑菌、抗禽流感病毒方面均比唾液酸寡糖和壳聚糖有不同程度的增强作用。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 第一章 文献综述
• 1 糖生物学的研究进展
• 1.1 糖生物学研究中的一场革命
• 1.2 糖基转移酶转基因细胞的出现
• 1.3 血型抗原LewisX 三糖结晶的分子结构的确定
• 1.4 寡糖配体和糖结构数据库的时代已经来临
• 2 壳聚糖的来源及其应用
• 2.1 壳聚糖的来源
• 2.2 壳聚糖的化学改性
• 2.3 壳聚糖作为缓释材料的应用
• 2.4 壳聚糖作为敷料的应用
• 2.5 壳聚糖降脂、降胆固醇和预防糖尿病的作用
• 2.6 壳聚糖的抑菌作用
• 2.7 壳聚糖的免疫调节作用
• 2.8 壳聚糖对肿瘤的作用
• 2.9 壳聚糖对病毒的作用
• 2.10 壳聚糖作为吸附剂
• 3 唾液酸寡糖的应用
• 3.1 唾液酸对婴儿的作用
• 3.2 唾液酸对神经中枢的作用
• 3.3 唾液酸对肿瘤的作用
• 3.4 唾液酸对流感病毒毒作用
• 4 本研究目的和意义
• 第二章 唾液酸寡糖-壳聚糖复合物的制备及其鉴定
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 仪器与设备
• 2.1.2 试剂与药品
• 2.1.3 方法
• 2.2 结果
• 2.2.1 唾液酸寡糖-壳聚糖复合物的鉴定
• 2.3 讨论
• 第三章 体外抑菌试验和对禽流感病毒吸附试验
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 体外抑菌试验
• 3.1.2 吸附试验（HI）
• 3.2 结果
• 3.2.1 体外抑菌试验
• 3.2.2 禽流感病毒的吸附试验
• 3.3 讨论
• 3.3.1 体外抑菌试验
• 3.3.2 对禽流感病毒的吸附试验
• 第四章 免疫试验
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 实验动物
• 4.1.2 药品和试剂
• 4.1.3 主要仪器
• 4.1.4 方法
• 4.2 结果
• 4.2.1 统计学处理
• 4.2.2 动物免疫抑制模型的建立
• 4.2.3 对自由基的影响
• 4.2.4 对T、B 和巨噬细胞的影响
• 4.2.5 对IL-2 和 IL-6 的影响
• 4.3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 导师简介