论文摘要
本研究选择酵母偏爱密码子同义替换鼠源性抗CD3抗体轻链可变区基因（Vκ）,与人源性轻链恒定区（Cκ）基因连接,构建完整的人鼠嵌合抗体轻链。将构建的完整的人鼠嵌合表达载体转化X-33毕赤酵母,建立兼具原核系统良好操作性和真核系统后加工性的重组抗CD3抗体毕赤酵母真核表达体系。在初步研究了发酵最佳条件后在80L发酵罐中进行大规模发酵表达,并对后续下游纯化条件做了初步探讨。结果表明,本研究正确构建了重组抗CD3抗体毕赤酵母真核表达体系,经甲醇诱导能够分泌重组抗CD3抗体轻链蛋白,重组抗CD3抗体轻链的表达具有累积效应,产量在一段时间内随表达时间延长而增加。本研究为进一步用毕赤酵母作为生物反应器大规模生产抗CD3抗体提供了实验依据。
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