论文摘要
背景与目的前列腺癌是严重危害男性健康的常见疾病。雄激素及其受体的功能在前列腺癌的发生、发展中具有重要作用。联合雄激素阻断是目前治疗晚期前列腺癌的主要手段。在治疗后雄激素受体在癌组织内仍然持续表达，前列腺癌最终向雄激素非依赖型转变。研究雄激素受体在前列腺细胞内信号调控的分子机理及其在肿瘤进展中所起的作用对我们认识和治疗前列腺癌将产生重要影响。雄激素的生理作用是通过雄激素受体而介导的。雄激素受体的转录功能需要共调节因子的参与。目前已经发现了多种雄激素受体的相关蛋白和共调节因子。它们在前列腺癌发展中的病理生理功能正在得到阐明。ARA54是雄激素受体重要的共调节因子。它能够激活雄激素受体的转录功能。ARA54也可以与其他雄激素受体共调节因子如SRC-1或ARA70产生协同作用，共同激活雄激素受体。雄激素受体转录功能的调控机理目前还未完全阐明。尚不清楚雄激素受体的共调节因子本身是否需要相关蛋白的进一步协助和调控。本研究意在探索雄激素受体共调节因子ARA54的相关蛋白及其对雄激素受体信号通路和前列腺癌进展所起的影响。材料与方法本研究采用CLONTECH酵母双杂交系统，以全长ARA54为诱饵从人类前列腺cDNA文库中筛选出转胶蛋白。克隆其全长cDNA后我们利用哺乳类双杂交、体外GST沉淀和免疫共沉淀再次验证了它与ARA54的相互作用。通过报告基因检测和siRNA沉默技术我们研究了转胶蛋白对ARA54及雄激素受体信号通路的影响。采用哺乳类双杂交和免疫荧光染色我们进一步探讨了转胶蛋白抑制雄激素受体转录功能的分子机理。利用基因转染和siRNA沉默技术我们研究了转胶蛋白对前列腺癌细胞株LNCaP生长以及前列腺特异性抗原表达的影响。最后我们采用免疫组化和组织芯片技术检测了正常和癌变前列腺组织内转胶蛋白的表达水平。结果我们的研究从人类前列腺cDNA文库中筛选出雄激素受体共调节因子ARA54的负调节相关蛋白—转胶蛋白（transgelin）。转胶蛋白可以抑制由ARA54增强的雄激素受体转录功能。转胶蛋白抑制雄激素受体转录功能必须通过ARA54的介导。转胶蛋白阻止ARA54二聚体的形成并阻断了雄激素受体与ARA54的结合，最终导致雄激素受体在胞浆内的滞留。前列腺癌细胞株LNCaP转染转胶蛋白后其前列腺特异性抗原表达和细胞生长均受抑制。由siRNA抑制内源性转胶蛋白表达则促进了LNCaP细胞生长及前列腺特异性抗原表达。人前列腺癌组织内转胶蛋白表达水平的降低进一步提示了它的肿瘤抑制功能。结论1．转胶蛋白是ARA54相关的雄激素受体二级调控因子。2．转胶蛋白阻止ARA54二聚体的形成并阻断了雄激素受体与ARA54的结合，最终导致雄激素受体在胞浆内的滞留。3．转胶蛋白抑制由ARA54增强的雄激素受体转录功能和前列腺癌细胞的生长。4．人类前列腺癌组织中转胶蛋白表达水平显著低于正常前列腺组织。5．人类前列腺癌组织中ARA54表达水平显著高于正常前列腺组织。6．ARA54具有直接正向调控雄激素受体和间接介导转胶蛋白负向调控的双重功能。
论文目录
相关论文文献
- [1].前列腺癌患者ARA54和Apaf的表达及临床意义[J]. 西部医学 2020(01)