论文摘要
背景及目的肠道微生态系统对机体健康的建立和维持发挥重要作用,肠道益生菌更是引起临床和科研工作者的重视。益生菌可以改善或纠正紊乱的消化道菌群,治疗便秘和腹泻,但对早产儿的临床应用并不多。益生菌的免疫调节作用目前受到广泛重视,其活菌、灭活菌、菌体裂解物及基因组DNA等均具有免疫调节功能,但目前的研究主要集中在离体细胞实验或动物实验,早产儿临床研究鲜见。早产儿的免疫学状态与婴幼儿及成人不同。目前认为,早产儿出生时免疫器官和免疫细胞已发育成熟,其免疫防御能力低下是因为以往未接触抗原刺激,未能建立免疫记忆反应。新生儿重症监护室（NICU）的早产儿处于相对限菌环境,抗生素应用,无法进行母乳喂养,需要接受多种医学操作,以上因素均可导致早产儿消化道正常菌群建立的延迟和肠道益生菌数量的减少甚至缺乏。培菲康是国内主要益生菌制剂之一,为粪肠球菌、嗜酸乳杆菌、长型双歧杆菌三联活菌胶囊,含菌量分别不低于107CFU,经口给药后可以分别定植在肠道的上、中、下部位,并分别于12h、24h及48h内进入生长稳定期,从而组成了一个在不同条件下都能生长,作用快而持久的联合菌群,在整个肠道粘膜表面形成一道生物屏障。本临床研究对NICU住院早产儿补充益生菌制剂培菲康,观察临床消化道症状,检测外周血相关免疫学指标,探讨及早补充益生菌对NICU早产儿消化道和免疫功能的影响,为早产儿临床应用益生菌及对于益生菌对早产儿免疫状态影响的进一步研究提供一定的理论基础。方法根据研究目的和临床可操作性设定出研究对象纳入标准,依据该标准从山东省立医院NICU中的住院早产儿纳入研究对象50例,随机分为对照组和益生菌组,各25例,益生菌组于开奶后即给予口服益生菌制剂14d。观察住院期间临床消化道表现,包括温盐水灌肠次数和腹泻发生率;采集生后14～16d股静脉血,采用郭峰花环率法检测红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）、红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICR）、红细胞C3b受体花环促进率（RFER）及红细胞C3b受体花环抑制率（RFIR）,采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群比例,采用免疫比浊法检测免疫球蛋白（Ig）和补体（C）,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞因子干扰素-gamma（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）。结果1.临床表现:益生菌组早产儿温盐水灌肠次数较对照组明显减少（P＜0.05）;益生菌组无腹泻病例发生,对照组1例住院期间发生腹泻,两组腹泻发生率经x2检验差异无统计学意义（P＞0.05）。2.外周血免疫学指标2.1红细胞免疫功能:较对照组,益生菌组RBC-C3bRR、RFER、RFER/RFIR明显增加（P＜0.05）,RFIR明显降低（P＜0.05）,而RBC-ICR改变无统计学意义（P＞0.05）。2.2 T淋巴细胞亚群比例:益生菌组外周血中CD4+细胞比例及CD4+/CD8+数值较对照组明显增加（P＜0.05,P＜0.05）,两组CD3+及CD8+T淋巴细胞比例差异无统计学意义（P＞0.05）。2.3免疫球蛋白和补体:益生菌组早产儿外周血免疫球蛋白IgM较对照组增加,有统计学意义（P＜0.05）,而免疫球蛋白IgG及补体C3、C4水平改变无统计学意义（P＞0.05）。2.4细胞因子:益生菌组早产儿外周血IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4数值较对照组差异无统计学意义（P＞0.05）,而IL-4水平高于对照组（P＜0.05）。结论1.及早补充益生菌可以促进NICU早产儿消化道蠕动,改善排便,明显减少早产儿大便排出延迟和温盐水灌肠次数。2.及早补充益生菌可以明显影响NICU早产儿外周血免疫学功能相关指标:增加RBC-C3bRR、RFER,降低RFIR;增加CD4+T淋巴细胞比例;提高免疫球蛋白IgM水平;提高细胞因子IL-4水平。3.早产儿对及早补充益生菌制剂耐受性良好,本研究为临床早产儿益生菌制剂的应用及进一步研究益生菌对早产儿免疫功能的影响提供了一定的理论基础。