论文摘要
目的 复制实验性糖尿病大鼠模型,研究胰岛素对糖尿病大鼠肾脏肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)表达的影响,通过观察MLCK的动态变化,探讨肌球蛋白轻链激酶与糖尿病肾病发病机制的相关性。方法 80只雄性SD大鼠适应性饲养一周,随机分为对照组和实验组。通过腹腔注射链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)复制大鼠糖尿病模型。当大鼠血糖值大于16.7mmol/L并持续至少5天,表明糖尿病动物模型己建立。糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(4周和12周)和胰岛素治疗组(4周和12周)。治疗组大鼠给予每天3单位鱼精蛋白锌胰岛素皮下注射。4周和12周时,分别用戊巴比妥钠麻醉大鼠,颈动脉取血用于血糖测定;取肾脏用冷PBS漂洗后,一只肾被切割并固定于4%多聚甲醛中,石蜡包埋、切片用于免疫组织化学分析和HE染色;另一只肾于—80℃冷冻保存或制备蛋白质样品用于Western blot分析MLCK等表达。结果 肾脏切片HE染色分析和一些生化指标的测定结果表明实验性糖尿病大鼠模型已被成功复制。免疫组化结果显示正常大鼠肾小球、肾小管、肾小球小动脉MLCK有较强的表达。与正常对照组相比,4周糖尿病大鼠肾脏中肌球蛋白轻链激酶的表达水平明显下调(为正常的33±8%),治疗组变化不明显(4周为正常的88±7%),12周糖尿病大鼠肾脏中肌球蛋白轻链激酶的表达水平明显增高(为正常的205±45%);治疗组糖尿病大鼠肾脏肌球蛋白轻链激酶表达水平下调(12周为正常的68±9%)。结论 长期高血糖可能导致肌球蛋白轻链激酶表达增加;胰岛素治疗可降低肾脏肌球蛋白轻链激酶的表达。
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标签：肌球蛋白轻链激酶论文; 糖尿病肾病论文; 胰岛素论文; 大鼠论文;