调节性T细胞异常在类风湿关节炎发病中作用的研究

论文摘要

目前,关于调节性T细胞（Treg）与类风湿关节炎（RA）发病的关系各家报道不一。为探讨Treg异常在RA发病机制中的作用,本研究应用实时荧光定量PCR技术检测RA患者外周血单个核细胞的Foxp3表达水平,并与患者DAS28评分、ESR、抗CCP抗体、CRP、RF水平及病程长短进行相关性分析;同时探讨糖皮质激素及免疫抑制剂对RA患者外周血单个核细胞Foxp3表达水平的影响。还对II型胶原（CII）免疫不同时期的胶原诱导性关节炎（CIA）模型鼠的胸腺、脾脏及腹股沟淋巴结Foxp3表达水平、CD4+CD25+T细胞数量进行了检测分析。结果显示, RA患者外周血单个核细胞Foxp3表达水平明显降低。RA患者Foxp3表达水平与DAS28评分、ESR及抗CCP抗体水平呈明显负相关,而与患者CRP、RF以及病程长短无明显相关性。免疫抑制剂和/或糖皮质激素治疗能够提高RA患者外周血单个核细胞Foxp3表达水平。CIA模型鼠发病后脾脏及腹股沟淋巴结Foxp3表达水平及CD4+CD25+T细胞比例均明显降低。免疫一次组脾脏及腹股沟淋巴结Foxp3表达水平明显低于对照组,但明显高于CIA组。在CIA发病过程中,模型鼠胸腺内Treg水平随免疫次数的增加而逐步降低。本研究的创新之处在于:第一,在国内外首次发现RA患者外周血单个核细胞Foxp3表达水平明显降低,并与反映疾病活动及病情进展的临床及实验室指标呈负相关,免疫抑制治疗可有效提高RA患者外周血单个核细胞Foxp3表达水平。提示RA患者体内可能存在Treg数量减少和/或功能缺陷,Treg异常可能是RA发病及病情进展的重要原因之一。第二,在国内外首次检测了CIA模型鼠发病过程的不同时期胸腺、脾脏及腹股

论文目录

• 英文缩写词表
• 前言
• 一、调节性T 细胞与类风湿关节炎发病机制研究的历史与现状
• （一） 调节性T 细胞分类及功能特点
• （二） Foxp3 与Treg
• （三） Treg 的临床应用前景
• （四） 类风湿关节炎的动物模型
• 二、本研究的目的及研究范围
• 研究工作
• 第一部分 类风湿关节炎调节性T 细胞研究
• 材料与方法
• 材料
• 一、研究对象及分组
• 二、主要试剂和仪器
• 方法
• 一、DA528 评分
• 二、荧光定量PCR
• 三、各种临床指标检测
• 结果
• 一、定量PCR 结果质量鉴定
• 二、定量PCR 仪检测人Foxp3 表达水平
• 讨论及本研究创新之处
• 一、类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Foxp3 表达水平
• 二、类风湿关节炎患者Foxp3 表达水平与RA 疾病活动性的关系
• 三、类风湿关节炎患者Foxp3 表达水平与各种临床指标的关系
• 四、类风湿关节炎患者Foxp3 表达水平与免疫抑制治疗的关系
• 第二部分 Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠调节性T 细胞水平研究
• 材料和方法
• 材料
• 一、实验动物来源
• 二、主要试剂和仪器
• 方法
• 一、CIA 动物模型的建立及评价
• 二、定量PCR 仪检测大鼠胸腺、脾脏及腹股沟淋巴结Foxp3 m RNA 表达水平
• +CD25⁺T 细胞比例.'>三、流式细胞仪检测大鼠胸腺、脾脏及腹股沟淋巴结CD4⁺CD25⁺T 细胞比例.
• 结果
• 一、Ⅱ型胶原诱导关节模型的建立与评价
• 二、定量PCR 法检测大鼠胸腺、脾脏及腹股沟淋巴结Foxp3 m RNA 表达水平
• 三、定量PCR 仪检测大鼠Foxp3 表达水平
• +CD25⁺T 细胞水平.'>四、流式细胞仪检测大鼠胸腺、脾脏及腹股沟淋巴结CD4⁺CD25⁺T 细胞水平.
• 讨论及本研究的创新之处
• 一、Ⅱ型胶原诱导关节模型的建立与评价
• 二、CII 对Lewis 大鼠外周淋巴器官Treg 水平的影响
• 三、Ⅱ型胶原对实验鼠胸腺Treg 水平的影响
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 致谢
• 攻读博士学位期间发表的学术论文
• 摘要
• Abstract