论文摘要
先天性心脏病、后天性瓣膜疾病形成的栓子脱落、体外循环心脏手术和手术后血流动力学的改变，都可能导致脑缺血缺氧，出现不同程度的神经系统并发症。一氧化氮（nitricoxide，NO）在神经系统损害中起重要作用，并且参与了缺血性神经元损害。一氧化氮合酶（nitricoxide synthase，NOS）是生物体内NO合成的限速酶，内皮型一氧化氮合酶（neuronal nitricoxide synthase，nNOS）来源的NO在脑缺血早期发挥损伤作用，诱导型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase，iNOS）来源的NO在脑缺血晚期发挥损伤作用。p38 MAPK通路与包括脑缺血、缺氧等多种因素所导致的神经损伤的病理过程有关，通过启动凋亡信号引起细胞损伤。细胞凋亡信号的出现可导致Caspase-3的活化，后者在各种因素启动的凋亡程序中起最后的枢纽作用。 线栓法制作大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion，MACO）局灶性脑缺血模型，成为现在应用最广泛的体内脑缺血模型；通过改变PC12细胞的培养环境，建立的缺氧细胞模型，是目前研究神经细胞缺氧最常用的体外模型。重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus rAAV）载体是目前唯一没有引起人类宿主任何病理反应的载体，具有低免疫原性、长期稳定表达携带的外源基因以及嗜神经等特点，已经成为神经系统疾病的新型基因治疗工具。 本研究目的在于探讨NOS和NO在脑缺血组织表达特点，以及NOS和NO对神经细胞毒性作用和引起神经细胞凋亡可能的通路，构建携带NOS反义基因的腺相关病毒载体，并转染到体内和体外缺血缺氧模型中，分别探讨转染后的神经细胞耐受缺血缺氧损伤和抑制缺血缺氧导致神经细胞凋亡的发生机制。本研究分为六部分展开论述，研究方法、结果和结论如下。 1．大鼠局灶性脑缺血模型的建立及一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）表达特点 1．1方法 应用线栓法制作大脑中动脉阻塞（MCAO）局灶性脑缺血模型，应用硝酸还
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