论文摘要
本论文的工作分为两部分:第一部分是新型促骨形成抗骨质疏松药物的合成与活性研究。临床使用的抗骨质疏松药物大多是抑制骨吸收的药物。为获得新型具有促进骨形成的药物,本基因为报告基因,通过测定模型荧光强度的变化来筛选试药的BMP-2上调活性。筛选得到化合物2-乙酰苯并噻吩（G39）体外活性较好,在大鼠体内也可以明显改善骨质疏松,G39小鼠灌胃给药TD50＞5g/kg,毒性很小。本论文在前期工作的基础上,继续进行具有苯并噻吩/苯并呋喃结构的化合物的合成与体内外活性筛选研究,合成得到了48个目标化合物,其中33个未见文献报道。将这48个目标物与其他23个结构类似物和对照药（前人合成的或商业购买的化合物）在同一批进行测试,测定它们在相同摩尔浓度下（4.0μM）在体外模型上上调BMP-2的活性,并讨论构效关系。溶剂0.1%DMSO空白对照的上调率设为100%,试验化合物中,BMP-2上调率＞200%的化合物有2个（6b:223%和2e:202%）;BMP-2上调率在170-200%之间的化合物有6个（1e:193%;12b:189%;2dA:186%:2c:185%和2f:181%）;BMP-2上调率在150-170%之间的化合物有5个（8b和11b:164%;10b:160%;1f:157%;5b:150%）。另外,BMP-2上调活性高于先导物G39（4.0μM,上调率115%）的化合物还有16b（144%）、1c（141%）、2dB（139%）、1dB1（124%）、9c（119%）、4c（118%）及11e（117%）。在试验药物浓度是对照药洛伐他丁（Lov,0.4μM）10倍的条件下,上述化合物体外上调BMP-2的活性均高于或相当于阳性对照药洛伐他丁（BMP-2上调率124%）。初步构效关系分析结果,苯环部分羧基或烷氧羰基的引入有利于化合物体外BMP-2上调活性的提高,尤其是苯环5,6位有甲氧或乙氧羰基取代时,活性增加更明显:苯环上甲氧基的引入对2-乙氧羰基苯并呋喃衍生物的活性提高更有利。综合考虑体外活性和结构特点,选择化合物8b、3c和S25和G39进行快速老化小鼠SAMP6（Senescence-accellerated mouse,strain6）体内进行抗骨质疏松活性的评价。G39在去势大鼠体内抗骨质疏松的作用在前期研究中已经得到证实,本论文又评价了G39在SAMP6小鼠体内对老年性骨质疏松的作用。结果显示,试验化合物均可上调小鼠体内BMP-2蛋白的表达,并不同程度的改善小鼠骨质疏松症状:其中,化合物8b的活性最明显,在体内可以改善小鼠的全身骨密度、改善小鼠骨量水平、提高小鼠血浆骨钙素水平高等作用明显;试验化合物对小鼠骨质疏松症状的改善与其促进骨形成有关。主要脏器的病理切片显示,在试验剂量下连续给药90天,试验化合物的无明显毒性;初步的毒性实验显示,S25在500mg/kg,、3c在700mg/kg和8b在500mg/kg剂量下分别一次性灌胃给药,对小鼠无明显毒副作用。第二部分是戊二酰亚胺抗生素结构改造与抗病毒活性研究。戊二酰亚胺类抗生素S632A和环己酰亚胺（Cycloheximide,CHX）具有多种抗病毒的活性,但其毒性均大,且S632A为油状物,不利于成药,本论文对这两个抗生素进行结构改造并测定其衍生物的抗病毒活性。对S632A共轭双键的氢化和氮原子的取代得到衍生物S522、S425和S525,但衍生物均失去了抗HIV-1,HSV-1和流感病毒的活性,说明共轭双键和N上的质子对于S632A的抗病毒活性是必需的。由于S632A的戊二酰亚胺六元环在碱性条件易开环,我们设计的成盐反应未能成功进行。结构的不稳定使得羟基保护和羰基还原的反应也未能成功进行。对CHX进行的结构改造的各种条件均使CHX的羟基脱水,而且得到两个产物1a和1b。经过制备液相色谱的分离,培养出1a的单晶,确定1a的绝对构型,发现1a是原料CHX的C-3”手性翻转的脱水产物,又测定1a和1b的圆二色谱,确定1b的C-3"手性。进而对1a进行进一步的衍生。但得到的衍生物也都失去抗HIV-1、抗HSV-1和抗流感的活性。CHX对乙肝病毒的DNA抑制作用不明显,但化合物1a和1b表现了对HBV较强的抑制作用,活性与拉米夫定相当,且1a和1b的选择指数（SI）相对于CHX明显增大。本部分一共得到13个化合物,其中10个目标产物,6个是未见文献报道的化合物,首次确定了2个已知化合物的绝对构型。