大白菜子叶再生体系的建立及遗传转化

论文摘要

以西北农林科技大学大白菜课题组提供的‘08S555’和‘陕秋白’两个大白菜（Brassica campestris syn. rapa L. ssp.pekinensis （Lour） Olsson）为试验材料,就影响大白菜带柄子叶再生的因素进行了研究。以‘06J28’大白菜作为遗传转化的材料,进行反常花器官转录因子基因正义表达载体的转化,在本实验室前期研究的基础上,研究了延迟筛选对大白菜遗传转化率的影响。取得了以下结果:1.在相同浓度的激素组合下,不论是6-BA和NAA,还是TDZ和NAA组合,都是‘陕秋白’的再生率高,‘08S555’的再生系数高。2.在6-BA和NAA激素组合时:‘08S555’较适宜的激素配比是5～7 mg?L-1 6-BA和0.3 mg?L-1 NAA,再生率为28.33%,再生系数为2.81个;‘陕秋白’适宜的激素配比是5～9 mg?L-1 6-BA和0.5 mg?L-1 NAA,最大再生率为68.33%,再生系数为1.09个。在TDZ和NAA激素组合时:0.5～1 mg?L-1 TDZ和0.5 mg?L-1 NAA为‘08S555’再生率的适宜激素配比,再生率为45.83%,再生系数为2.55个;‘陕秋白’适宜的激素配比是0.1～0.7 mg?L-1 TDZ和0.5 mg?L-1 NAA,再生率为79.17%,再生系数为1.24个。3. AgNO3与细胞分裂素及生长素配合使用能提高‘陕秋白’子叶不定芽的再生率。5 mg?L-1 6-BA、0.5 mg?L-1 NAA和6 mg?L-1AgNO3为‘陕秋白’再生率最适宜的组合,再生率为74.25%;当TDZ浓度为0.3 mg?L-1、NAA为0.5 mg?L-1和AgNO3为6 mg?L-1时,‘陕秋白’再生率最高,达到87.50%。4. 1/2MS培养基中添加不同浓度的NAA和IBA的诱导生根比较表明:相同浓度的NAA根系生长状况比IBA好,NAA浓度为0.3 mg?L-1时,幼苗根系发达,主根增多、长且粗;须根也很密,幼苗生长健壮。5.以‘06J28’无菌苗带柄子叶为试验材料,用农杆菌菌液侵染后,延迟筛选7 d后,共得到24个抗性植株,经PCR检测有5个再生植株含有目的片段。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 引言
• 1.2 大白菜再生体系的建立
• 1.2.1 再生方式
• 1.3 影响大白菜再生体系建立的因素
• 1.3.1 内在因素
• 1.3.2 外在因素
• 1.3.3 大白菜离体培养存在的主要问题
• 1.4 大白菜遗传转化的研究进展
• 1.4.1 主要转化途径
• 1.4.2 影响根癌农杆菌介导的因素
• 1.4.3 反常花器官转录因子的研究进展
• 1.5 本研究目的与意义、研究内容与技术路线
• 1.5.1 本研究目的与意义
• 1.5.2 研究内容
• 1.5.3 本研究的技术路线
• 第二章 两种基因型大白菜子叶离体再生体系的建立
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 实验结果
• 2.2.1 不同激素浓度配比对子叶不定芽再生的影响
• 2.2.2 硝酸银对子叶不定芽再生的影响
• 2.2.3 不定芽的生根与再生植株
• 2.3 讨论
• 第三章 大白菜的遗传转化
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法步骤
• 3.1.3 转基因植株的检测
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 延迟筛选时间和筛选时间对遗传转化的影响
• 3.2.2 转化植株的检测
• 3.2.3 转基因大白菜的性状观察
• 3.3 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 试验中使用药品的缩略语表
• 致谢
• 作者简介