研究REGγ与E-cadherin的关系以及对肿瘤细胞迁移调控的分子机制

论文摘要

目前,蛋白酶体激活因子REGy的功能研究逐渐被完善,REGy继被报导在甲状腺癌中高表达,人们发现其还在胃癌、卵巢癌、肾癌、结肠癌、肺癌、乳腺癌等癌症中高表达,而且随着癌症恶性程度的增加,REGy的表达水平逐渐上升。那么REGy到底在肿瘤恶性发展过程中起到怎样的作用需要进一步研究和探索。本文通过Transwell功能实验首次发现REGy促进多种肿瘤细胞的迁移。随后对其分子机制研究发现：REGy下调钙粘着蛋白E-cadherin的mRNA水平。进一步的分子机制发现：REGy上调E-cadherin的抑制转录因子Snail2、Zeb2,并且这种上调是受TGFP信号通路介导的。此外,本文还通过Western和IHC方法发现REGy可以降解内源Smurf2,因此提出一个调控机制：REGy通过对Smurf 2的降解影响Smad依赖的TGF(3信号通路对E-cadherin的调控。这些研究结果为肿瘤治疗提供了更多的新思路。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 第一节 蛋白酶体降解系统
• 第二节 REGγ的研究进展
• 第三节 REGγ和癌症
• 第四节 肿瘤细胞迁移概述
• 4.1 EMT过程概述
• 4.2 EMT的分子机制
• 第二章 材料与方法
• 第一节 实验材料
• 第二节 实验方法
• 1. Transwell实验
• 2. 免疫印迹实验
• 3. 石蜡切片的准备与免疫组化实验
• 4. 裸鼠肿瘤模型
• 5. siRNA敲除实验
• 6. 抽提总的RNA
• 7. 反转RNA
• 8. 荧光定量PCR---SYBR法检测
• 9. 半定量PCR实验
• 10. HE染色实验
• 第三章 结果与分析
• 第一节 REGγ影响肿瘤细胞的迁移
• 1. REGγ在癌组织或癌细胞中高表达
• 2. REGγ促进肿瘤细胞的迁移
• 第二节 REGγ影响钙粘着因子E-cadherin及其转录因子的表达
• 第三节 REGγ通过TGFβ介导的信号通路影响E-cadherin及其转录因子的mRNA水平
• 第四节 REGγ通过对Smurf 2的降解影响Smad依赖的TGFβ信号通路对E-cadherin的调控
• 第五节 裸鼠肿瘤模型的建立
• 第六节 参与其他课题的实验结果
• 第四章 讨论
• 附录
• 参考文献
• 致谢