细胞外基质对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞中RANTES、eotaxin、TGF-β1表达的调控

论文摘要

目的气道慢性炎症和气道重塑是支气管哮喘（简称哮喘）的重要特征,与气道平滑肌的功能状况密切相关。最新研究发现,气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cell,ASMCs）除收缩、增殖和迁移特性外,还具有重要的免疫调节功能。ASMCs能以自分泌和旁分泌的方式产生多种细胞因子、趋化因子、生长因子、细胞粘附分子及大量细胞外基质（extracellular matrix,ECM）,在启动和维持哮喘气道炎症和气道重塑中起着重要作用。对ASMCs免疫功能的新认识,使探讨哮喘ASMCs免疫功能调控的细胞分子机制成为哮喘发病机制研究新的热点和哮喘治疗新的靶点。体外研究表明,IL-1β、TNFα等炎症因子可诱导非哮喘ASMCs能分泌多种免疫调节因子,如细胞因子、趋化因子、生长因子、细胞粘附分子及大量细胞外基质。这些免疫调节因子可调节B淋巴细胞和T淋巴细胞增殖和免疫球蛋白分泌、促进嗜酸性粒细胞等炎症细胞的募集和生存、反过来促进ASMCs自身的增殖和分化,在启动和维持哮喘气道炎症和气道重塑中起着重要作用。但是,目前国内外对调控哮喘ASMCs免疫功能的细胞分子机制尚不清楚。气道平滑肌及细胞外基质作为气道壁维持气道结构和功能的重要组成成分,二者间的相互作用在哮喘气道炎症和气道重塑中起着重要作用。在哮喘病理发展过程中不仅有ASMCs数量的增加和功能的改变,而且还有ECM量和组成的改变。在哮喘气道ECM各组分中,纤维连接蛋白（fibronectin,FN）、I型胶原（type I collagen,COL-1）、层粘蛋白（laminin,LA）显著增加。ECM能调控ASMCs的生存、增殖和迁移等生物学行为。但目前国内外尚未有ECM对哮喘ASMCs免疫功能的调控作用及调控机制的报道。调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子（regulated on activated normal T expressed and secreted,RANTES）、嗜酸性粒细胞特异性趋化因子（eotaxin）、转化生长因子β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）参与哮喘气道炎症和气道重塑。因此本实验拟探讨ECM对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞中RANTES、eotaxin、TGF-β1表达的调控作用。方法wistar雄性大鼠随机分为哮喘组（8只）和正常对照组（8只）。通过卵清蛋白（OVA）致敏后,OVA激发的方法建立哮喘模型。将培养的大鼠气道平滑肌细胞分别种植于涂覆有FN、LA、COL-1的培养瓶中。实时定量PCR和Western-blot法检测ASMCs中RANTES、eotaxin、TGF-β1 mRNA和蛋白的表达。结果实时定量PCR和Western-blot法的结果都表明,RANTES、eotaxin、TGF-β1这三种因子的表达,哮喘空白组的表达相对于正常对照空白组表达升高,升高具有统计学意义（p<0.05）;哮喘组内,用ECM干预的表达显著高于空白组,具有统计学意义（p<0.05）;在正常对照组内,各组间表达无差异性（p>0.05）。结论细胞外基质可能参与哮喘气道平滑肌细胞免疫功能的调控作用。

论文目录

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• 英文摘要
• 正文 细胞外基质对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞中 RANTES、eotaxin、TGF-β1 表达的调控
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 支气管平滑肌细胞的免疫调节功能
• 致谢