球兰体外抑菌作用及球兰粗皂苷部分活性研究

论文摘要

球兰在福建地区分布广泛,是一种常见的传统药材,对多种疾病具有独特的疗效,在民间的应用范围很广。为了科学、有效开发和利用这一植物资源,进行了如下试验：1球兰提取物体外抗菌效果研究应用管碟法测定球兰的5种提取液,即球兰茎水提取液、球兰茎80%乙醇提取液、球兰叶水提取液、球兰叶80%乙醇提取液、球兰叶汁5种提取液对嗜水气单胞菌、链球菌、海安气单胞菌、大肠埃希氏菌、易损气单胞菌等9种菌株的体外抑菌效果。结果表明：球兰茎80%乙醇提取液对链球菌、嗜水气单胞菌有较好的抑制效果；球兰茎水提液对嗜水气单胞菌有较好的抑制效果；球兰叶80%乙醇提取液对海安气单胞菌有较好的抑制效果；球兰叶水提液对大肠埃希氏菌有较好的抑制效果；球兰叶汁对易损气单胞菌有较好的抑制效果。总之,球兰提取物在体外条件下对不同细菌有一定的抑菌作用。2球兰提取液化学成分验证应用常规化学方法,对球兰提取液进行化学成分的初步验证。结果：球兰茎80%乙醇提取液中主要含有有机酸、皂苷类、糖（多糖或其苷类）、黄酮类、香豆素（内酯或其苷类）、甾体（三萜类）等化学物质；球兰茎水提液中主要含有有机酸、皂苷类、氨基酸（蛋白质或多肽类）、糖（多糖或其苷类）、香豆素（内酯或其苷类）、甾体（三萜类）等化学物质；球兰叶80%乙醇提取液中主要含有有机酸、糖（多糖或其苷类）、黄酮类、香豆素（内酯或其苷类）、甾体（三萜类）等化学物质；球兰叶水提取液中主要含有有机酸、皂苷类、氨基酸（蛋白质或多肽类）、甾体（三萜类）等化学物质；球兰叶汁中主要含有有机酸、皂苷类、氨基酸（蛋白质或多肽类）、糖（多糖或其苷类）、黄酮类、强心苷、香豆素（内酯或其苷类）、甾体（三萜类）等化学物质。总之,球兰提取液主要以皂苷、有机酸为主。3球兰粗皂苷分离与提取使用正丁醇有机溶剂的传统提取方法对球兰中的皂苷成分进行初步提取与分离,经泡沫试验和各种显色反应证实提取物主要成分为皂苷。可见,应用该法对球兰中的皂苷成分进行提取是可行的。4球兰粗皂苷药理作用的研究研究球兰粗皂苷的体外抗氧化作用和溶血效应。结果：球兰粗皂苷具有较强的总抗氧化能力,对O2-·由基有一定的清除能力,最大清除率为63.20%；粗皂苷具有一定的溶血效应,最低溶血溶度为2mg/mL,对红细胞有一定的破坏程度。可见,球兰粗皂苷具有一定的体外抗氧化能力和体外溶血效应。5球兰粗皂苷对小鼠生理功能影响的研究研究球兰粗皂苷对浓氨水引咳小鼠的止咳祛痰效果,以及对小鼠生理生化指标的影响。结果表明：球兰粗皂苷能延长小鼠咳嗽潜伏期和减少3min内咳嗽次数,增加痰液分泌量；能提高正常小鼠的SOD、GSH-Px水平,降低MDA含量；提高正常小鼠血清中总蛋白、AKP含量,降低尿素氮含量。由此,球兰粗皂苷具有较强的止咳祛痰作用,能有效改善机体抗氧化能力。6球兰粗皂苷中的皂苷成分纯化条件优化采用制备型液相色谱对球兰粗皂苷中的皂苷成分纯化条件进行初步摸索,得出皂苷制备液相色谱的初步分离条件为：柱子：Pursuit XRs C18柱,流动相：乙腈-水（14：86）,柱温：20℃左右,流速1mL/min,检测波长：203nm、210nm.本试验对球兰茎粗皂苷可能具有的活性功能进行检验,为进一步推广球兰在临床中的应用提供参考。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 球兰简介
• 2 中药材及其抑菌作用
• 2.1 中药材抑菌作用机理
• 2.2 中药材体外抑菌作用研究
• 2.2.1 单味中药
• 2.2.2 复方制剂
• 2.2.3 中药与抗生素合用
• 2.3 中药材体外抑菌试验
• 3 皂苷
• 3.1 结构分类
• 3.2 皂苷溶解性
• 3.3 皂苷的鉴别
• 3.3.1 溶血实验
• 3.3.2 泡沫实验
• 3.3.3 显色实验
• 3.4 皂苷活性
• 3.4.1 表面活性
• 3.4.2 抗凝血、溶血作用
• 3.4.3 抗细菌、真菌活性
• 3.4.4 降血脂、血糖、胆固醇作用
• 3.4.5 增强免疫调节作用
• 3.4.6 祛痰、止咳
• 3.4.7 抗癌、抗肿瘤
• 3.4.8 抗氧化作用、抗衰老作用
• 3.4.9 杀虫作用
• 4 中药材及其提取
• 4.1 中药材的提取及原理
• 4.2 中药材提取的必要性
• 5 中药材研究前景
• 6 本试验研究目的意义
• 第一章 球兰体外抑菌效果观察
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 球兰茎水提液、球兰茎80%乙醇提取液的抑菌效果
• 2.2 球兰叶水提液、球兰叶80%乙醇提取液和球兰叶汁的抑菌效果
• 3 讨论
• 3.1 中药材及球兰的体外抑菌作用
• 3.2 球兰各提取液体外抑菌作用效果的比较
• 3.3 球兰各提取液对链球菌的抑制作用的比较
• 4 本章小结
• 第二章 球兰各提取液化学成分验证
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 球兰叶汁、80%乙醇提取液、水提取液的化学成分预试结果
• 2.2 球兰茎80%乙醇提取液、水提液化学成分预试结果
• 3 讨论
• 3.1 中药材化学成分验证背景
• 3.2 中药材化学成分验证原理
• 3.3 中药材化学成分验证注意事项
• 4 本章小结
• 第三章 球兰粗皂苷提取、检验
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 水饱和正丁醇的制备
• 1.2.2 球兰总皂苷的提取（粗品）
• 1.2.3 球兰粗皂苷的提取（总皂苷初步分离纯化）
• 1.2.4 粗皂苷的检验
• 2 结果与分析
• 2.1 泡沫试验结果
• 2.2 显色反应验证结果
• 2.3 滤纸片溶血试验结果
• 3 讨论
• 3.1 中药材中皂苷成分常见的提取方法
• 3.2 中药材中皂苷成分常见的分离、纯化方法
• 3.3 球兰粗皂苷的提取
• 4 本章小结
• 第四章 粗皂苷溶血性质研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 2%兔红血球液的制备
• 1.2.2 球兰粗皂苷生理盐水溶液的制备
• 1.2.3 溶血现象观察（A组）
• 1.2.4 最低溶血浓度的测定（B组）
• 1.2.5 溶血程度计算
• 2 结果与分析
• 2.1 A组粗皂苷的溶血作用观察
• 2.2 B组粗皂苷的溶血作用观察
• 2.3 B组粗皂苷的溶血率
• 3 讨论
• 3.1 中药材皂苷成分的溶血作用
• 3.2 皂苷溶血试验条件研究
• 3.3 球兰粗皂苷溶血性质
• 4 本章小结
• 第五章 粗皂苷体外抗氧化活性研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 粗皂苷总抗氧化力的测定
• 2^-·）清除率的测定'>1.2.2 粗皂苷体外超氧阴离子（O₂^-·）清除率的测定
• 2 结果与分析
• 2.1 粗皂苷体外总抗氧化力
• 2^-·的清除率'>2.2 粗皂苷体外对O₂^-·的清除率
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 第六章 球兰粗皂苷止咳、祛痰研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 咳嗽合格实验鼠的筛选
• 1.2.2 试验小鼠的分组
• 1.2.3 试验小鼠的饲养
• 1.2.4 小鼠咳嗽试验
• 1.2.5 酚红标准曲线的绘制
• 1.2.6 小鼠祛痰试验
• 2 结果与分析
• 2.1 球兰粗皂苷对小鼠咳嗽的影响
• 2.2 球兰粗皂苷对小鼠祛痰的影响
• 2.2.1 酚红标准曲线
• 2.2.2 球兰粗皂苷对小鼠祛痰的影响
• 3 讨论
• 3.1 止咳、祛痰研究背景
• 3.2 皂苷成分的止咳、祛痰作用
• 3.3 祛痰试验研究方法
• 3.4 制造氨水环境的注意事项
• 4 本章小结
• 第七章 球兰粗皂苷对小鼠抗氧化水平与血清生化指标的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 粗皂苷对小鼠抗氧化水平的影响
• 2.2 粗皂苷对小鼠血清生化指标的影响
• 3 讨论
• 3.1 皂苷成分的抗氧化作用
• 3.2 皂苷成分体内、外抗氧化作用与“益气”之间的关系
• 3.3 皂苷成分对血清生化指标的影响
• 3.4 球兰粗皂苷活性功能研究
• 4 本章小结
• 第八章 球兰粗皂苷制备液相条件的初步探索
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 3.1 制备型液相色谱及其在分离纯化皂苷成分中的应用
• 3.2 制备型液相色谱的应用前景
• 3.3 制备型液相色谱在分离纯化球兰皂苷的意义
• 4 本章小结
• 主要结论
• 创新点
• 有待进一步研究的问题
• 参考文献
• 缩略词表
• 致谢