论文摘要
背景：肝癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，研究表明肝癌发生与遗传及后天发生机制等多种因素有关，但是其分子机制仍不是很清楚。迄今为止，已经发现了很多种肝癌相关基因，连接蛋白（connexin Cx）基因就是其中之一。Cx基因家族被认为是一种肿瘤抑制基因，已经在许多肿瘤组织中发现表达下降，其中包括肝细胞癌。下调机制不是很清楚。目的：了解在肝癌细胞株（HepG2株）Cx32基因表达沉默中的甲基化调节作用，以利于恢复肝细胞癌Cx的正常表达，恢复正常细胞间隙通讯功能，为肝癌的诊断和治疗提供一定的理论依据。方法：运用甲基化酶抑制剂（5—杂氮脱氧胞苷），将试验分无5-杂氮脱氧胞苷组、含不同浓度的5—杂氮脱氧胞苷（1uM和5uM组）培养HepG2细胞株，采用细胞免疫组化方法分析Cx32的蛋白质表达；采用甲基化特异性PCR技术检测Cx32基因启动子的甲基化状态。结果：3组细胞中Cx32蛋白表达总阳性率为18.5％（+17％、++1.5％）、77％（+65.5％、++11.5％）、88％（+58％、++30％），统计分析，Cx32表达增加，且定位异常，P值均＜0.01，差异具有显著性，去甲基化后细胞生长速度减慢，恶性程度下降；甲基化特异性检测结果分别为甲基化、部分及完全去甲基化。结论：1．HepG2中Cx32基因甲基化阳性，Cx32基因表达下调，提示肝癌存在Cx32基因表达异常；2．HepG2中Cx32基因去甲基化后可增加表达，细胞生长抑制，提示肝癌Cx32基因表达受到甲基化调控；3 HepG2中增加的Cx32仍存在定位异常，提示还可能有其他因素的参与调节。
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标签：肝癌细胞株论文; 连接蛋白论文; 甲基化转移酶抑制剂论文; 甲基化特异性论文;