茶叶多糖的化学修饰及体外抗凝血作用研究

论文摘要

血栓栓塞性疾病严重威胁着人类健康。因凝血因素导致此类疾病的增加已引起普遍重视,国家卫生部已把抗凝血、防血栓作为心、脑血管病的治疗准则之一。目前应用于临床治疗的抗凝血药物主要是肝素和香豆素类,有诱发血小板症等副作用。开发对血栓栓塞性疾病具有预防作用的新型药物或功能性食品具有重要的意义。茶叶既有营养作用,又有药理作用,茶多糖是其中的重要功效成分之一。茶多糖具有降血糖、降血脂、抗凝血、抗血栓、抗氧化增强免疫力、降血压、减慢心率、增加冠脉流量和耐缺氧等药理作用。我国茶叶资源丰富,地域分布广泛,使得茶多糖的开发前景十分广阔。本研究以乌龙茶叶为材料,结合抗凝血活性检测,对茶叶中的抗凝血活性多糖成分进行提取、分离以及DEAE-52纤维素柱层析纯化,获得四个茶多糖组分（TPSⅠ、TPSⅡ、TPSⅢ和TPSⅣ）;选用硫酸化、乙酰化和羧甲基化分别对TPSⅡ进行分子改造,分析茶多糖经化学修饰前后的抗凝血活性变化以及红外光谱特征。研究结果表明:1.茶叶中的茶叶多糖具有抗凝血作用。茶叶多糖能明显延长人体血浆APTT值,而对PT、TT值的影响不显著,表明茶叶多糖主要通过影响内源性凝血系统而发挥抗凝血作用。在实验范围内,检测体系中茶多糖的浓度越高其抗凝血作用也越强。2.茶多糖经脱蛋白后,抗凝血活性增强,而脱色处理后,活性降低。茶多糖经DEAE-52纤维素柱层析后,分离出四个多糖组分。其中茶多糖组分Ⅱ为茶多糖总量的57.36%,抗凝血活性也相对较强。3.茶多糖组分Ⅱ经硫酸化、乙酰化和羧甲基化修饰后,抗凝血活性进一步增强,化学修饰试剂与多糖的比例以及修饰反应时间在一定的范围内,影响茶多糖分子结构的变化程度,相应改变抗凝血活性。4.红外光谱分析表明,茶多糖经化学修饰后,硫酸基、乙酰基和羧甲基均已与多糖分子结合成酯。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 血液凝固及检测指标
• 1.1.1 人体凝血系统概述
• 1.1.2 抗凝检测仪器与方法
• 1.1.3 抗凝检测指标与原理
• 1.2 抗凝血活性物质研究进展
• 1.2.1 动物源抗凝血活性物质
• 1.2.2 植物源抗凝血活性物质
• 1.3 茶叶多糖研究概述
• 1.3.1 茶叶多糖的组成及理化性质
• 1.3.2 茶叶多糖的提取与分离纯化方法
• 1.3.3 茶叶多糖的结构研究概述
• 1.3.4 茶叶多糖的药理作用研究进展
• 1.4 多糖的化学修饰研究进展
• 1.4.1 多糖的硫酸化修饰
• 1.4.2 多糖的乙酰化修饰
• 1.4.3 多糖的羧甲基化修饰
• 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料、试剂及仪器
• 2.1.1 试验材料与试剂
• 2.1.2 试验仪器
• 2.2 试验步骤与方法
• 2.2.1 试验路线
• 2.2.2 茶叶多糖的提取
• 2.2.3 茶叶多糖的脱蛋白与脱色
• 2.2.4 茶叶多糖的DEAE-52纤维素柱层析
• 2.2.5 茶叶多糖的硫酸化修饰
• 2.2.6 茶叶多糖的乙酰化修饰
• 2.2.7 茶叶多糖的羧甲基化修饰
• 2.2.8 体外抗凝血活性检测方法
• 2.2.9 茶叶多糖的红外光谱分析
• 3 结果与分析
• 3.1 茶叶多糖的分离纯化及抗凝血活性检测
• 3.1.1 茶叶多糖的体外抗凝血作用
• 3.1.2 茶叶多糖的脱蛋白和脱色与抗凝血活性的关系
• 3.1.3 茶叶多糖的DEAE-52柱层析纯化及抗凝血活性检测
• 3.2 茶叶多糖的化学修饰及抗凝血作用分析
• 3.2.1 茶叶多糖的化学修饰及抗凝血作用
• 3.2.2 化学修饰反应条件对茶多糖抗凝血作用的影响
• 3.3 茶叶多糖的红外光谱分析
• 4 讨论
• 4.1 茶多糖的抗凝血作用分析
• 4.2 本试验的创新点和主要成果
• 4.3 展望
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 攻读硕士期间发表的文章