丁苯酞对Aβ25-35诱导的PC12细胞损害的保护作用及其机制

论文摘要

目的阿尔茨海默病（AD）是一种进展性的神经变性性疾病,以脑内Ap聚集而形成的淀粉样纤维沉积为特征。目前尚无有效地治疗办法来阻止疾病的发生及进展。最近的研究表明,AD患者脑内氧化还原失衡和Ap沉积能够导致氧化诱导的细胞凋亡发生。丁苯酞（NBP）是一种治疗缺血性卒中的有效且有前景的药物,可通过多种作用途径来影响疾病的病理生理过程。据此,本试验将探讨NBP对Aβ25-35诱导的PC12细胞的作用。因此我们用NBP对Aβ25-35诱导的PC12细胞进行预处理,观察其对PC12细胞凋亡的影响及线粒体变化,来探讨NBP对Aβ25-35诱导PC12细胞是否具有保护作用及可能机制。方法对数生长期的PC12细胞分为3组：正常对照组、模型组、NBP组。细胞培养24h后,NBP组加入终浓度为10μmol/L的NBP预处理2h,再与模型组同时加入终浓度为10μmol/LAβ25-35,继续培养48 h收集细胞检测指标。采用MTT比色法分析细胞存活率,HE染色、PI流式细胞仪检测凋亡,用分光光度法检测MAD及SOD活性观察细胞氧化应激,利用电镜观察线粒体超微结构的变化,运用western blot检测胞浆Cyt-C和Bcl-2蛋白表达。结果MTT显示NBP组细胞存活率明显高于模型组（P<0.05）,并且中剂量存活率最高；HE染色及流式细胞学结果显示NBP组较模型组细胞凋亡率明显下降（P<0.05）;SOD活性NBP组较模型组细胞明显增加,而MDA活性降低；电镜结果显示模型组线粒体数量和形态发生了明显的改变,而NBP组线粒体数量多,结构比较完整；western blot显示：NBP组Bcl-2蛋白表达增加,而模型组明显减少（P<0.05）；模型组胞浆Cyt-C表达最强,而NBP组有较弱的Cyt-C表达（P<0.05）。结论NBP可以提高细胞存活率,降低凋亡率,对Ap诱导神经细胞毒性起保护作用。NBP对Ap诱导神经细胞毒性抗凋亡机制可能与诱导了神经细胞抗凋亡基因Bcl-2的表达,稳定了线粒体的结构,抑制了线粒体通透性转换孔（PT）的开放,阻止了Cyt-C从线粒体释放入胞浆有关,同时NBP抑制MDA活性,降低脂质过氧化,激活SOD清除氧自由基,起到了保护线粒体的作用。综上结果分析表明：NBP治疗对减轻Aβ导致的神经细胞的凋亡、保护线粒体可能有着积极的作用,合理的NBP治疗在一定程度上可减轻痴呆患者的症状。随着对NBP基础和临床研究的深入,NBP将会开辟治疗神经系统变性疾病的新途径。

论文目录

• 一、摘要
• 中文论著摘要
• 英文论著摘要
• 二、英文缩略语
• 三、论文
• 前言
• 实验材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 四、本研究创新性自我评价
• 五、参考文献
• 六、附录
• 综述
• 在学期间科研成绩
• 致谢
• 个人简介