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钙失敏在大鼠失血性休克血管低反应性中的作用及其调控分子

2020-11-22阅读(919)

钙失敏在大鼠失血性休克血管低反应性中的作用及其调控分子

论文摘要

严重创伤/休克失代偿期常出现血管的低反应性,主要表现为全身血管对缩血管物质和舒血管物质的反应降低或不反应,目前研究发现它可能与NO 水平增高、血管平滑肌细胞（VSMC）钾、钙通道功能失常等诱发的NE、Ang-Ⅱ、内皮素受体失敏以及细胞膜超极化有关,但抑制NO、改善钾、钙通道功能、恢复受体敏感性以及细胞膜极化状态并不能完全逆转休克的血管低反应性。近年来研究发现严重创伤、休克后心肌细胞存在钙超载和钙失敏（calcium desensitization,即心肌细胞收缩蛋白对钙的敏感性降低,收缩力/钙比率降低）的现象,致使心肌细胞对以增高胞内钙离子浓度[Ca2+]i为主要作用机制的传统强心药不敏感。本实验室以前的研究发现休克后血管平滑肌细胞同样存在钙超载现象,虽然休克后血管平滑肌细胞的胞内钙并不低,但血管反应性仍然是低的,因此推测休克后血管平滑肌细胞可能存在钙失敏,钙失敏可能在休克血管低反应的发生中起重要作用。这方面目前国内外尚缺乏研究。为此本研究利用大鼠失血性休克模型,以肠系膜上动脉为研究对象,研究了失血性休克后大鼠血管平滑肌是否存在钙失敏,钙失敏在大鼠失血性休克血管低反应性中的作用,以及Rho-激酶、PKC和PKG 对钙敏感性的调控作用以及可能机制。主要方法:取失血性休克大鼠肠系膜上动脉（SMA）,利用离体血管环张力测定技术,用血管环对梯度浓度去甲肾上腺素（NE）的收缩力反映血管反应性,用去极化状态下（120 mmol/L K+）血管环对梯度浓度Ca2+的收缩力反映血管的钙敏感性。实验分三部分,第一部分实验观察失血性休克低反应性血管是否存在钙敏感性的降低,以及通过观察钙敏感性调节剂血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）、胰岛素和Rho-激酶特异性拮抗剂fasudil是否可以通过调节钙敏感性来调节血管反应性,以证实钙失敏在休克血管低反应形成中的作用。第二部分观察Rho-激酶激动剂Ang-Ⅱ和拮抗剂fasudil、PKC 激动剂PMA和拮抗剂staurosporine、PKG 激动剂8Br-cGMP 和拮抗剂KT-5823 对失血性休克血管钙敏感性的影响,以了解Rho-激酶、PKC 和PKG 对钙敏感性的调控作用。第三部分观察MLCP 拮抗剂Calyculin A 对Rho-激酶、PKC、PKG 调节失血性休克血管钙敏感性的影响,以探讨Rho-激酶、PKC 和PKG 调控钙敏感性的可能机制。

论文目录

  • 英文缩写一览表
  • 英文摘要
  • 中文摘要
  • 论文正文 钙失敏在大鼠失血性休克血管低反应性中的作用及其调控分子
  • 前言
  • 第一部分实验 钙失敏在失血性休克大鼠血管低反应性形成中的作用
  • 实验一 失血性休克大鼠低反应性血管钙敏感性的改变
  • 材料与方法
  • 结果
  • 实验二 钙失敏在失血性休克大鼠血管低反应性中的作用
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二部分实验 Rho-激酶、PKC、PKG 对失血性休克大鼠肠系膜上动脉钙敏感性的调节作用
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第三部分实验 Rho-激酶、PKC、PKG 调节失血性休克大鼠血管钙敏感性与的关系
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 全文总结
  • 参考文献
  • 文献综述一 血管平滑肌细胞舒缩及钙敏感性的调控机制
  • 文献综述二 血管平滑肌细胞钙敏感性调控与休克血管低反应性发生的关系
  • 硕士期间撰写和发表的论文
  • 致谢

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