HPLC法在大豆卵磷脂及人血清白蛋白和IgG纯化方面的研究

论文摘要

高效液相色谱法具有分离效能高、分离速度快、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、操作易自动化、对样品适用范围广、便于用作制备色谱等优点。由于它使用了非破坏性检测器,样品被分析后,在大多数情况下可除去流动相,因此可用于生物样品的纯化制备。本文立足于高效液相色谱法的诸多优点,在大豆卵磷脂及人血清白蛋白和IgG的高效液相色谱法分离与纯化方面做了研究。全文结构如下：首先,概述了生物大分子色谱分离的基本模式、整体柱的发展历程及其在分离纯化生物大分子领域的应用以及大豆卵磷脂、人血清白蛋白和IgG的纯化方法。然后,采用自装的硅胶半制备柱对大豆卵磷脂的分离纯化条件做了优化,制得了纯度为94.82%的高纯卵磷脂。该法高效、快速、所得卵磷脂纯度高、回收率高、溶剂消耗量小、成本低廉,由于使用了无毒的乙醇作为洗脱剂可以大大减少残留有毒溶剂影响产品质量的问题。最后,基于实验室所具有的条件,在弱阴离子交换整体柱在人血清白蛋白和IgG纯化方面做了探索,结果发现人血清白蛋白和IgG在整体柱上能够得到较好的分离。考察了色谱条件对分离纯化结果的影响因素,利用电泳检测收集到的白蛋白和IgG纯度。该方法步骤简单,效果显著,且负载量大,在人血浆中IgG和白蛋白的大规模制备方面有着广阔的发展前景。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 概述
• 1.2 色谱分离模式
• 1.3 整体柱
• 1.4 大豆磷脂
• 1.5 人血清白蛋白
• 1.6 IgG
• 第2章 大豆卵磷脂的高效液相分离与制备
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.3 结果与讨论
• 2.4 结论
• 第3章 弱阴离子交换整体柱对人血浆白蛋白和IgG的纯化
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.3 结果与讨论
• 3.4 结论
• 参考文献
• 硕士研究生期间发表和待发表的学术论文
• 致谢