本文主要研究内容
作者莫健新,王豪强,黄广燕,蔡更元,吴珍芳,张献伟(2019)在《微生物源果胶酶在猪PK15细胞中异源表达及其酶学性质分析》一文中研究指出:果胶是植物细胞壁组分之一,是畜禽饲料中主要的抗营养因子,影响畜禽对日粮中能量和氮的利用效率。果胶酶在自然界中广泛存在于细菌、酵母和丝状真菌等微生物中,对解除果胶的抗营养作用、提高饲料利用率具有良好的效果。为了探索在猪细胞中表达微生物源果胶酶基因的可行性,本研究通过脂质体转染法将微生物源果胶酶基因pg5a、pgI、pga3A和pgaA导入猪PK15细胞中进行异源表达,利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)法测定这4种基因编码果胶酶的酶活力。结果显示,4种果胶酶基因均能在猪PK15细胞中转录出mRNA,但只有pg5a和pgI适应猪细胞表达系统。其中,果胶酶PG5A的最高酶活为0.95 U/mL,最适作用pH为pH4.0,在pH4.6~6.0范围内维持46%以上的酶活;PGI在pH5.0处获得最高酶活,为0.30 U/mL,在pH4.0~6.0范围内维持35%以上的酶活。消化蛋白酶耐受实验结果显示,PG5A和PGI对胃蛋白酶和胰蛋白酶均有较强的耐受能力,用1mg/mL的猪胃蛋白酶处理2h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为76%和71%;用1 mg/mL的猪胰蛋白酶处理2 h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为44%和93%。综上所述,果胶酶基因pg5a和pgI能在猪细胞中正常表达,其编码的果胶酶对猪消化道pH条件和消化蛋白酶具有较强的耐受能力,可作为制备转果胶酶基因猪的候选基因。
Abstract
guo jiao shi zhi wu xi bao bi zu fen zhi yi ,shi chu qin si liao zhong zhu yao de kang ying yang yin zi ,ying xiang chu qin dui ri liang zhong neng liang he dan de li yong xiao lv 。guo jiao mei zai zi ran jie zhong an fan cun zai yu xi jun 、jiao mu he si zhuang zhen jun deng wei sheng wu zhong ,dui jie chu guo jiao de kang ying yang zuo yong 、di gao si liao li yong lv ju you liang hao de xiao guo 。wei le tan suo zai zhu xi bao zhong biao da wei sheng wu yuan guo jiao mei ji yin de ke hang xing ,ben yan jiu tong guo zhi zhi ti zhuai ran fa jiang wei sheng wu yuan guo jiao mei ji yin pg5a、pgI、pga3Ahe pgaAdao ru zhu PK15xi bao zhong jin hang yi yuan biao da ,li yong 3,5-er xiao ji shui yang suan (3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)fa ce ding zhe 4chong ji yin bian ma guo jiao mei de mei huo li 。jie guo xian shi ,4chong guo jiao mei ji yin jun neng zai zhu PK15xi bao zhong zhuai lu chu mRNA,dan zhi you pg5ahe pgIkuo ying zhu xi bao biao da ji tong 。ji zhong ,guo jiao mei PG5Ade zui gao mei huo wei 0.95 U/mL,zui kuo zuo yong pHwei pH4.0,zai pH4.6~6.0fan wei nei wei chi 46%yi shang de mei huo ;PGIzai pH5.0chu huo de zui gao mei huo ,wei 0.30 U/mL,zai pH4.0~6.0fan wei nei wei chi 35%yi shang de mei huo 。xiao hua dan bai mei nai shou shi yan jie guo xian shi ,PG5Ahe PGIdui wei dan bai mei he yi dan bai mei jun you jiao jiang de nai shou neng li ,yong 1mg/mLde zhu wei dan bai mei chu li 2hhou ,PG5Ahe PGIde sheng yu mei huo fen bie wei 76%he 71%;yong 1 mg/mLde zhu yi dan bai mei chu li 2 hhou ,PG5Ahe PGIde sheng yu mei huo fen bie wei 44%he 93%。zeng shang suo shu ,guo jiao mei ji yin pg5ahe pgIneng zai zhu xi bao zhong zheng chang biao da ,ji bian ma de guo jiao mei dui zhu xiao hua dao pHtiao jian he xiao hua dan bai mei ju you jiao jiang de nai shou neng li ,ke zuo wei zhi bei zhuai guo jiao mei ji yin zhu de hou shua ji yin 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自遗传的莫健新,王豪强,黄广燕,蔡更元,吴珍芳,张献伟,发表于刊物遗传2019年08期论文,是一篇关于果胶酶论文,果胶论文,抗营养因子论文,转基因论文,遗传2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自遗传2019年08期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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