靶向性重组人Tum-5融合蛋白的克隆、表达、纯化及生物学活性的测定

论文摘要

血管新生与一些病理过程密切相关,其中肿瘤的生长和转移完全依赖于血管的新生。血管基膜的成分参与调节血管的新生。Tumstatin（胶原Ⅳ α3链的非胶原区域1）是一种内源性血管生长抑制因子,它与内皮细胞膜上的α v β3整合素结合进而抑制内皮细胞蛋白的合成,导致内皮细胞凋亡,使肿瘤血管的生成受到抑制,抑制肿瘤细胞的生长、浸润和转移。Tum-5是由Tumstatin接近N端的54-132位氨基酸组成的,它是Tumstatin抗血管形成的功能结构域。以非RGD依赖的形式与整合素α v β 3结合来调节血管新生。具有与全长Tumstatin相同的抑制血管新生的作用。 NGR是从噬菌体展示文库中筛选出的一种可以和肿瘤新生血管特异性结合,含13个氨基酸的寡肽。利用NGR肽高亲和力结合特性,已经成功的将病毒载体、放射性示踪剂等靶向性运输到肿瘤组织的新生血管处。与抗体导向分子相比,靶向性多肽作为导向分子构建融合蛋白,具有易于制备、免疫原性低的优点。我们利用基因工程技术将NGR融合在Tum-5的C末端,期望Tum-5-NGR融合蛋白能在肿瘤新生血管处富集,达到有效抑制肿瘤生长的作用,同时能减少全身用药量,降低毒副反应,提高量效比。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言和文献回顾
• 1 肿瘤血管生成与其生长、转移及其治疗的关系
• 1.1 肿瘤血管的生成
• 1.2 肿瘤侵袭转移与肿瘤血管生成
• 1.3 肿瘤治疗与血管生成
• 2 Tumstatin和Tum-5
• 2.1 Tumstatin的发现
• 2.2 Tumstatin的结构及分布
• 2.3 Tumstatin的生物学活性
• 2.4 Tumstatin的作用机制
• 2.5 Tum-5的结构与功能
• 3 NGR导向肽
• 3.1 多肽导向技术
• 3.2 NGR导向肽的发现
• 3.3 NGR导向肽受体CD13/APN
• 3.4 NGR导向肽在治疗中的应用
• 正文
• 1 试验设计和目的
• 2 实验材料
• 3 实验方法
• 4 实验结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢