PDX-1基因编码蛋白对1型糖尿病大鼠血糖的影响

论文摘要

目的:应用基因工程相关方法和技术完成大鼠胰腺十二指肠同源异型盒基因1（pancreatic duodenal homebox 1,PDX-1）的克隆、扩增,建立表达系统并诱导基因表达,分离纯化后获得其编码蛋白质:PDX-1编码蛋白。利用链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）制备1型糖尿病Wistar大鼠动物模型,将PDX-1编码蛋白静脉注射入1型糖尿病大鼠体内,观察PDX-1蛋白对大鼠血糖的影响。方法:从Wistar大鼠胰腺细胞提取总RNA,建立Wistar大鼠胰腺细胞基因文库,筛选获得目的基因:PDX-1基因,选择、制备载体,将目的基因与载体进行基因重组,建立基因表达系统,诱导基因表达,分离纯化PDX-1表达蛋白。利用STZ诱导1型糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为实验组及对照组。分别予以尾静脉注射PDX-1蛋白及等量生理盐水,注射后每周检测一次空腹血糖,观察实验组与对照组血糖、胰岛素、C肽浓度及胰腺病理切片中胰岛细胞数量等的差异,为期12周。各监测点血糖值、胰岛素及C肽结果均采用均数±标准差（（?）±S）表示,用PEMS3.1统计软件处理。实验组与对照组各项测定指标进行两样本均数t检验。结果:PDX-1编码蛋白经十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）检测及考马斯亮蓝染色证实,其分子量与理论值30830.77一致。将PDX-1蛋白溶于生理盐水,尾静脉注射,注射后第3周末,两组大鼠血糖无差异（P>0.05）,自第4周末始实验组血糖低于对照组（P<0.05）,第12周末实验组血糖低于对照组（P<0.05）,实验组血清胰岛素、C肽结果高于对照组（P<0.05）,胰岛细胞数量多于对照

论文目录

• 摘要
• Abstrat
• 前言
• 资料和方法
• 1.PDX-1编码蛋白的表达
• 1.1 表达载体pET-21a（+）-PDX-1质粒的构建
• 1.2 PDX-1编码蛋白的表达和纯化
• 2.糖尿病动物模型制备
• 2.1 实验动物及饲养条件
• 2.2 药物及用法
• 2.3 结果
• 3.动物实验
• 3.1 分组
• 3.2 静脉注射PDX-1蛋白
• 3.3 监测血糖
• 3.4 检测胰岛素、C肽
• 3.5 胰腺病理检查
• 4.统计分析
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读硕士期间发表的学位论文