灵芝菌株改善学习记忆作用及其机制研究

论文摘要

灵芝收载于《中国药典》2005年版第一部,为多孔菌科真菌赤芝Ganodermalucidum(Leyss.ex Fr.)Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao,Xu et Zhang的干燥子实体。具有补气安神、止咳平喘的功效。由于目前进行灵芝栽种、品种选育的多为农业科学工作者,使其缺乏“传统药材”的系统研究;其次灵芝本身存在菌株间的化学成分差异和功效差异的情况,加之我国的食药用菌品种登记制度尚未完善,造成我国灵芝资源品种混杂:而目前我国针对不同灵芝品种进行药效特异性研究的报道较少。因此,不同灵芝品种的混用制约了其更好的应用和开发。灵芝是亚洲国家常用的抗衰老药物,现代药理研究表明灵芝具有抗肿瘤、调节机体免疫功能、治疗心脑血管疾病的作用,而对灵芝的神经保护作用研究甚少。针对上述现象,本论文采用了菌株拮抗实验及栽培实验对8株不同灵芝菌株的表型遗传差异性进行了初步研究;并对不同灵芝菌株进行了改善学习记忆的药效学筛选实验;将筛选出作用较显著的菌株(ZL2)采用经典行为学方法,研究该灵芝菌株改善学习记忆的药效作用;并采用胆碱递质测定的实验方法,研究其对神经递质的影响:还考察其在体外对PC12细胞增殖的影响,在细胞水平上对其神经保护作用机制进行了探讨。结果表明:1.供试菌株间都存在明显的表型遗传差异和药效差异,其中ZL3与ZL4菌株表型遗传差异性较小,亲缘关系相对较近,其余灵芝菌株拮抗关系强,表型遗传差异较大。不同菌株间的药效差异的存在对灵芝的药效品质有着较大影响。2.药效学实验研究中,灵芝菌株ZL2具有明显的改善学习记忆的作用。具体表现为:ZL2灵芝菌株可提高不同损伤模型动物的学习记忆能力,并对学习记忆不同阶段均有正向影响。3.在机制探讨中,ZL2灵芝菌株改善学习记忆的作用的可能机制为:提高脑组织内乙酰胆碱含量、降低胆碱酯酶活力;诱导神经元的分化,对抗β淀粉肽导致的神经毒性及氧化损伤。综上所述,不同的灵芝菌株间存在着遗传差异及药效品质的差异,其中ZL2灵芝菌株具有改善学习记忆作用,作用机制可能是提高脑组织内乙酰胆碱含量、降低胆碱酯酶活力,诱导神经元的分化,对抗β淀粉肽导致的神经毒性及氧化损伤。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文符号说明
• 第一部分 不同灵芝菌株的表型遗传差异性研究
• 前言
• 1.材料
• 1.1 试验菌株
• 1.2 培养基
• 1.3 仪器
• 1.4 试剂
• 2.方法与结果
• 2.1 灵芝资源的引进及拮抗试验
• 2.1.1 菌株活化培养
• 2.1.2 对峙培养
• 2.2 不同灵芝菌株表型遗传差异性研究
• 2.2.1 菌株菌丝生长速度及长势差异比较
• 2.2.2 菌株子实体表型遗传特性差异比较
• 2.2.3 综合表型遗传差异性分析
• 3.小结
• 第二部分 灵芝菌株改善学习记忆的药效学筛选实验
• 前言
• 1.材料
• 1.1 试验药物
• 1.2 试验动物
• 1.3 仪器
• 1.4 数据统计
• 2 方法与结果
• 2.1 试验药物的剂量设计、制备方法、给药途径
• 2.1.1 剂量设计
• 2.1.2 样品制备、药物配制方法
• 2.1.3 给药途径
• 2.1.4 动物分组
• 2.2 不同灵芝菌株对小鼠跳台实验的影响
• 2.3 不同灵芝菌株对小鼠Morris水迷宫实验的影响
• 3.小结
• 第三部分 ZL2灵芝菌株对学习记忆作用的药效学研究
• 前言
• 1.材料
• 1.1 试验药物
• 1.2 试验动物
• 1.3 仪器
• 1.4 数据统计
• 2 方法与结果
• 2.1 试验药物的剂量设计、制备方法、给药途径
• 2.1.1 剂量设计
• 2.1.2 样品制备、药物配制方法
• 2.1.3 给药途径
• 2.2 ZL2灵芝菌株对正常小鼠学习记忆能力的影响
• 2.2.1 对正常小鼠跳台实验的影响
• 2.2.2 对正常小鼠Morris水迷宫实验的影响
• 2.3 ZL2灵芝菌株对老年小鼠学习记忆能力的影响
• 2.3.1 对老年小鼠跳台实验的影响
• 2.3.2 对老年小鼠Morris水迷宫实验的影响
• 2.4 ZL2灵芝菌株对记忆获得障碍动物学习记忆能力的影响
• 2.4.1 对记忆获得障碍小鼠跳台实验的影响
• 2.4.2 对记忆获得障碍小鼠Morris水迷宫实验的影响
• 2.4.3 对记忆获得障碍大鼠穿梭箱实验的影响
• 2.5 ZL2灵芝菌株对记忆巩固障碍动物学习记忆能力的影响
• 2.5.1 对记忆巩固障碍小鼠跳台实验的影响
• 2.5.2 对记忆巩固障碍小鼠Morris水迷宫实验的影响
• 2.5.3 对记忆巩固障碍大鼠穿梭箱实验的影响
• 2.6 ZL2灵芝菌株对记忆再现障碍动物学习记忆能力的影响
• 32.6.1 对记忆再现障碍小鼠跳台实验的影响
• 2.6.2 对记忆再现障碍小鼠Morris水迷宫实验的影响
• 2.6.3 对记忆再现障碍大鼠穿梭箱实验的影响
• 3.小结
• 第四部分 ZL2灵芝菌株对学习记忆作用的机制研究
• 前言
• 1.材料
• 1.1 试验药物
• 1.2 试验动物
• 1.3 细胞株
• 1.4 仪器
• 1.5 试剂
• 1.6 数据统计
• 2 方法与结果
• 2.1 试验药物的剂量设计、药物配制、给药途径
• 2.1.1 剂量设计
• 2.1.2 药物、培养液配制方法
• 2.1.3 给药途径
• 2.2 ZL2灵芝菌株对小鼠脑组织乙酰胆碱含量、胆碱酯酶活力的影响
• 2.3 ZL2灵芝菌株改善学习记忆作用的神经保护机制探讨
• 2.3.1 PC12细胞培养
• 2.3.2 PC12细胞生长曲线测定
• 2.3.3 实验用药血清、脑脊液的制备
• 2.3.4 血清浓度、脑脊液浓度的选择
• 2.3.5 含药血清、脑脊液对PC12细胞增殖的影响
• 2.3.6 含药血清、脑脊液对PC12细胞分化的影响
• 2.3.7 含药血清、脑脊液对β淀粉样肽细胞毒性模型的影响
• 3.小结
• 讨论
• 结论
• 问题与展望
• 参考文献
• 文献综述一
• 文献综述二
• 致谢
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果