精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸生精细胞HIF-1α、VEGF、Bax表达的影响

论文摘要

目的:研究精索静脉曲张（VC）对大鼠睾丸生精细胞HIF-1α、VEGF和Bax表达的影响,探索精索静脉曲张引起不育的机理。意义:精索静脉曲张是导致男性不育的重要原因之一,其中约1/3男性不育患者伴有精索静脉曲张,但不是所有精索静脉曲张患者都表现为精液异常,其中仅15%-20%的患者出现不育而其他患者依然可以生育这一现象目前没有合理的解释,有待于对其病理生理机制的进一步研究。近年来对精索静脉曲张的不育机制提出了许多假设,睾丸缺氧被认为是精索静脉曲张导致睾丸病理损害的原因之一,我们通过建立精索静脉曲张动物模型,测定缺氧标志物HIF-1α的表达,研究精索静脉曲张睾丸曲细精管内生精细胞是否存在低氧,同时测定VEGF和Bax的表达以研究与缺氧相关的病理生理事件如血管诱导和凋亡等,探讨VC不育的机制。方法:1.精索静脉曲张大鼠模型的建立:成年雄性Wistar大鼠（7周龄,体重180-220克）48只,随机分为实验组和假手术组（对照组）共6组,分别为30天组、60天组、90天组,其中相对应的30天、60天、90天模型中,假手术组（SOG）和实验组（VG）分别每组8只。VG组大鼠部分结扎左肾静脉,复制精索静脉曲张模型;假手术组只行左肾静脉分离不结扎。2.免疫组化检测HIF-1α、VEGF和Bax的表达:分别于术后30天、60天,90天处死实验组和假手术组大鼠,取出左侧睾丸,电子天平分别称其重量,用带目镜测微器的手术显微镜测量蔓状静脉与精索静脉之间的静脉直径,用Bowin固定液固定后进行石蜡包埋,切片后行免疫组化检测HIF-1α、VEGF和Bax的表达和HE染色观察病理学改变。阳性表达结果以平均光密度（OD）作为测定指标。结果:1.HE染色结果:VG组睾丸组织结构损害呈局灶性或弥漫性,以局灶性为多。表现为生精上皮细胞排列紊乱,广泛脱落,伴有炎性表现和精子减少;假手术组则表现为曲细精管内各级生精细胞排列有序,形态正常,无明显的病理改变。2. VG组和SOG组大鼠左侧睾丸重量和左侧精索静脉直径比较:比较VG组与SOG组的左侧睾丸重量和左侧精索静脉直径有显著性差异（P<0.05）, VG组的左侧睾丸重量明显减轻、左侧精索静脉扩张;比较曲张组各组之间的左侧睾丸重量以及各组间的左侧精索静脉直径差异有显著性（P<0.05）,随着建模时间延长,VG组左侧睾丸重量减轻,左侧精索静脉扩张程度加重。3.免疫组化观察HIF-1α的表达情况: HIF-1α表达主要见于生精细胞的细胞质,以精母细胞明显,也见于曲细精管外周膜细胞的胞核。比较SOG各组间HIF-1α的表达无显著性差异（P>0.05）;VG各组间的表达存在明显差异（P<0.01）;分别将VG和SOG组在30天、60天、90天的HIF-1α表达作平行比较,二者在30天和60天的表达存在明显差异（P<0.01）,90天的表达无显著性差异（P>0.05）。4.免疫组化观察VEGF的表达情况:VEGF的表达主要见于生精细胞的胞质。比较SOG各组间VEGF的表达无显著性差异（P>0.05）;VG各组间的VEGF表达存在明显差异（P<0.05）;分别将VG和SOG组在30天、60天、90天的VEGF表达作平行比较,二者在30天和90天的表达存在明显差异（P<0.05）,60天的表达无显著性差异（P>0.05）。5.免疫组化观察Bax的表达情况:Bax表达见于生精细胞的胞质和胞核,以精母细胞为主。比较SOG各组间Bax的表达无显著性差异（P>0.05）;VG各组间Bax的表达存在明显差异（P<0.01）;分别将VG组和SOG组在30天、60天、90天的Bax表达作平行比较存在明显差异（P<0.01）。结论:1.所建立大鼠精索静脉曲张模型的睾丸组织中存在HIF-1α的表达,为VC的低氧学说提供了客观的证据。2.随着建模时间延长,HIF-1α和VEGF的表达量降低,二者呈正相关,提示二者可能参与VC的保护机制。3. Bax在VG组不同时期的表达均高于SOG组,随着建模时间延长,Bax的表达增加,提示VC可促进睾丸细胞凋亡,同时HIF-1α与Bax的表达呈负相关,提示HIF-1α有抑制生精细胞凋亡的可能。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸生精细胞HIF-1α、 VEGF、Bax 表达的影响
• 前言
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 致谢
• 硕士期间发表的论文