论文摘要
一、背景： 热休克蛋白27（heat shock protein 27，Hsp27），属于小分子热休克蛋白家族，在成纤维细胞、中性粒细胞和神经元等非肌源性细胞中，已被证实具有抗氧化应激和抗细胞凋亡的生物学功能。在离体心脏中，业已初步发现Hsp27可提高心肌细胞对高温应激（即热休克）诱导细胞凋亡的耐受性，但其作用机制尚不清楚；不仅如此，Hsp27在整体动物心肌中的生物学作用，更有待阐明。 二、目的： 分别在细胞水平和整体水平，探讨Hsp27在氧化应激诱导的心肌细胞损伤和化学药物诱导的心肌毒性中的生物学功能，并对其制进行初步探讨。 三、方法： [体外研究]克隆和重组人心肌Hsp27基因，并观察其高表达对大鼠心肌细胞株H9c2过氧化损伤的影响及其机制 1．将RT-PCR获得的人心肌Hsp27基因全长cDNA，重组入真核表达载体pcDNA3.1（+），再瞬时转染293T细胞株进行真核表达活性鉴定，进而转染大鼠心肌细胞株H9c2，再经G418选择性培养，最后获得稳定转染和稳定表达Hsp27基因的H9c2细胞株。 2．以稳定转染Hsp27的H9c2（Hsp27 H9c2）和空载体转染的H9c2（CON）为实验对象，不同浓度H2O2刺激后，进行下列分析：①倒置光学显微镜观察细胞形态学变化；②测定乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）从胞质向胞外释放的活性；③细胞凋亡水平；④胞内总活性氧自由基(reactive oxygen species，
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