细叶百合组织培养及多倍体诱导研究

论文摘要

细叶百合（Lilium. pumilum）,为百合科百合属植物,是东北高寒地区野生种,花色鲜红,花被片反卷下垂,具有良好的观赏特性。细叶百合多分布在山的阴坡疏林下,适应性强,具有较强的抗性,是百合抗性育种的重要亲本,,也是优良的园林绿化植物材料。目前,由于自然生态环境遭到破坏,细叶百合的自然分布量锐减,因此,野生种质资源的保存和繁殖显得更为重要。本研究采用植物组织培养技术,以细叶百合种球的鳞片和花器官的各组织部位等（包括花瓣,花托,花丝,子房,花柱）为外植体,通过器官直接发生、愈伤组织两种不同途径,建立了细叶百合组织培养再生体系；进行了细叶百合种子最适萌发条件的试验,并以无菌种子为材料进行了多倍体诱导,经染色体倍数鉴定,确定获得了多倍体植株。研究为野生细叶百合繁殖及多倍体育种奠定了工作基础,同时为进一步开展分子育种奠定基础。主要研究结果如下：1.以细叶百合鳞片为外植体建立了无菌培养系,鳞片在MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA1.5 mg/L的培养基上分化率最高,达到100%,且长势良好；在MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的培养基上,增殖倍数达3.7；最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/l,且移栽成活率可达100%。在鳞片诱导分化过程中,存在位置效应,不定芽诱导率依次为外层>中层>内层；下部>中部>上部。2.以花器官不同组织部位为外植体,通过愈伤组织途径建立无菌培养体系,结果表明：诱导花托愈伤组织的最佳培养基为MS+NAA0.5 mg/L+6-BA0.5mg/L;诱导子房愈伤组织的最佳培养基为MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.Omg/L;诱导花柱愈伤组织的最佳培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0 mg/L;诱导花瓣愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D2 mg/L+KT2 mg/L.诱导花丝愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D2 mg/L+KT2mg/L,其愈伤组织不定芽分化最适培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA2.0 mg/L。各种花器官外植体诱导愈伤组织由易到难依次为花托>花丝>子房>花柱>花瓣。最适合花托愈伤组织增殖和不定芽产生的培养基是MS+NAA0.2 mg/L+6-BA2.0 mg/L。IBA可以明显增强其生根的效果,浓度以0.5mg/L为宜,移栽成活率可达100%。3.细叶百合种子最适萌发条件研究表明,培养基为MS,温度25℃是细叶百合种子萌发的最适条件,采用人为添加无菌水的方式,可以有效保证种子的高萌发率。4.利用秋水仙素对细叶百合种子进行加倍处理,秋水仙素浓度为0.1%,处理时间为24h时,变异率最高达30%。植株叶片变厚,株型增大,植株粗壮,生长旺盛；通过气孔观察,四倍体植株气孔增大,密度减小；对变异植株进行根尖压片,成功获得了四倍体植株,所得染色体数目为2n=4x=48。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 百合组织培养研究进展
• 1.2.1 快速繁殖
• 1.2.2 种球脱毒
• 1.2.3 新品种培育
• 1.3 百合多倍体诱导研究进展
• 1.3.1 多倍体诱导
• 1.3.2 多倍体鉴定
• 1.3.3 百合多倍体的应用前景
• 1.4 研究的目的意义
• 2 细叶百合鳞片再生体系的建立
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 不同6-BA和NAA浓度组合对鳞片不定芽诱导的影响
• 2.2.2 不同部位外植体对不定芽再生的影响
• 2.2.3 不同6-BA和NAA浓度组合对不定芽增殖的影响
• 2.2.4 不同浓度IBA对再生芽生根与植株移栽的影响
• 2.3 本章小结
• 3 细叶百合花器官外植体再生体系建立
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 不同种类、浓度的生长调节剂组合对花器官愈伤组织诱导及不定芽再生的影响
• 3.2.2 花器官不同部位外植体再生能力比较分析
• 3.2.3 不同浓度6-BA对花托愈伤组织增殖及不定芽分化的影响
• 3.2.4 不同浓度IBA对不定芽生根与移栽的影响
• 3.3 本章小结
• 4 细叶百合种子萌发最适条件研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 不同培养基对细叶百合种子萌发及诱导的影响
• 4.2.2 不同温度和水分条件对细叶百合种子萌发及诱导的影响
• 4.3 本章小结
• 5 细叶百合多倍体的诱导
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 方法
• 5.2 结果与分析
• 5.2.1 秋水仙素对细叶百合种子的诱导效果
• 5.2.2 多倍体植株的鉴定
• 5.3 本章小结
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢