论文摘要
胞吞是细胞生命活动的基础。胞吞过程受阻或胞内的物质运输障碍往往会导致许多重大疾病的发生。网格蛋白(clathrin)介导的胞吞是目前研究得最清楚的途径,介导实现了膜受体等蛋白质的特异性回收;巨胞饮(macropinocytosis)是非特异性地内吞胞外大量液相物质的过程,由于缺乏颗粒或细胞的包被诱导其形成,因此形成的巨胞饮体大小各异。由于缺乏特异性的分子标记及明确的分子特征,使得对巨胞饮的研究受到限制。本文以Hela细胞为模型,研究两种不同分子大小的液相物质(10 kDa和70 kDa dextran)的内吞,观察其分别对clathrin途径、巨胞饮途径的依赖性及其对GTPase dynamin的依赖性。研究发现,大分子的液相物质主要通过巨胞饮这一条途径内吞进入细胞,且该途径是dynamin不依赖的过程;而小分子的液相物质则能通过dynamin不依赖的巨胞饮和dynamin依赖的小胞饮两种途径共同作用进入细胞,当其中一条途径被阻断时,另外一条的功能会代偿性地提高。我们因而提出,在巨胞饮的研究中,大分子量(70 kDa)的dextran更适于被用作巨胞饮途径的内吞标记物。胞吐与胞吞的作用过程相反。由八个亚基蛋白组成的Exocyst(又称Sec6/8)复合体是首先在酵母上发现的一种重要的囊泡栓系因子,在生物演化过程中从酵母到人高度保守。酵母上的研究表明该复合体主要对细胞极性胞吐途径中由反面高尔基体出芽的运输囊泡与质膜的栓系发挥重要作用。近来也有报道指出exocyst可能在胞吞途径上具有重要作用。本文通过RNAi的方式沉默exocyst复合物的亚基SEC10,揭示SEC10在哺乳动物细胞的clathrin介导的内吞途径中发挥重要作用,可能通过影响胞吞后早期的转运过程而间接影响胞吞活动。