论文摘要
目的:通过建立大鼠高脂血症模型以动态观察其在不同时间点上所致大鼠血管内皮细胞损伤后血浆vWF、PAI-1和t-PA分子标志物的表达并比较其异同点,以找出一个或几个敏感性、特异性较高的反映内皮细胞损伤的分子标志物,为早期临床诊断和血栓性疾病的治疗提供指导。方法:取体重为200±20g健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组(10只/组):高脂合剂灌胃7周组(A7组),高脂合剂灌胃8周组(A8组),高脂合剂灌胃9周组(A9组);普通饲料喂养7周组(C7组),普通饲料喂养8周组(C8组),普通饲料喂养9周组(C9组)。各高脂合剂灌胃组与普通饲料喂养组分别设立对照。普通饲料喂养组(C组)按照成年大鼠常规方法喂养,高脂合剂灌胃组(A组)除予常规方法喂养外,每日另根据其体重不同给予不同剂量的高脂合剂灌胃一次,各组每周称重一次,调整灌胃剂量。高脂合剂灌胃组与普通饲料喂养组分别饲养至第7、8、9周时,分批处死各组动物,取血标本,分离血清立即测定血脂;取大鼠主动脉制成病理切片光镜下观察内皮的病理改变,根据血脂及病理切片确定内皮细胞的损伤及程度;并另取血浆分装储存于-70℃冰箱备用,待标本收集齐后,再以ELISA方法检测血浆vWF、PAI-1和t-PA的含量并比较其在内皮损伤的不同时期和不同程度下各自表达的异同。结果:①7、8、9周高脂合剂灌胃组大鼠血脂TG、TC和LDL均高于其相应对照组,而HDL则先随灌胃时间的增加而升高,但随着灌胃时间的延长再次降低。通过血脂检测及病理切片检查证实大鼠形成高血脂症模型和内皮出现损伤,且内皮损伤随灌胃时间延长、血脂的升高而加重;②在三个模型组中,血浆中vWF和PAI-1含量随着造模时间的延长而增加;t-PA的含量随着造模时间的延长而降低;③在A7和A8组vWF的表达比较无明显差别,它不随内皮病变的改变而变化;PAI-1在模型组中,随内皮细胞损伤的加重而呈逐渐增高的趋势;t-PA在模型组中,随内皮细胞损伤的加重而呈逐渐递减的趋势。结论:①随着高脂饲料喂养时间的延长,大鼠血浆中TG、TC和LDL逐渐升高,HDL先升高再降低,大鼠血管内皮细胞随高脂血症持续时间的延长病理损伤逐渐加重。②本实验发现随血管内皮细胞损伤加重血浆中vWF和PAI-1分子的表达升高,t-PA的表达降低,血浆中vWF、PAI-1和t-PA的改变可作为判断高脂血症大鼠血管内皮细胞损伤的分子标志物。③本实验发现血管内皮细胞损伤的早期vWF表达水平不能及时随血管内皮病理的改变而变化,而PAI-1和t-PA随血管内皮细胞损伤不同时期、不同程度而表达不同。提示在高脂血症大鼠血管内皮细胞损伤中,反映血管内皮细胞早期的病理改变PAI-1和t-PA比vWF更敏感。
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