电针对急性脊髓损伤大鼠差异表达基因及谷氨酸作用的实验研究

电针对急性脊髓损伤大鼠差异表达基因及谷氨酸作用的实验研究

论文摘要

本论文分文献综述和实验研究两部分。第一部分文献综述文献综述分三个方面,回顾了近年来国内外对脊髓损伤(SCI)的研究概况。主要从动物模型的选择和应用、脊髓损伤的机理研究及脊髓损伤的治疗等三个方面进行评述。第二部分动物实验目的:探讨电针对急性脊髓损伤保护作用的机理。原理方法:选取60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、药物组、电针组,用改良Allen’s打击法制成脊髓损伤模型,损伤6h后取材。(1)运动联合计分法(CBS)综合评定大鼠脊髓损伤后的神经功能;(2)测定损伤后局部组织超氧化物歧化酶、丙二醛和谷氨酸含量;(3)取电针组、模型组和空白组的损伤局部组织,提取mRNA,经标记、杂交、清洗、基因芯片扫描、图像的采集与数据分析等过程,获得差异表达基因,通过生物信息学方法对这些差异表达基因在急性脊髓损伤中的作用进行功能分析;(4)采用qRT-PCR法检测损伤局部组织中基因Capn8、Sphk1、Ccl2的表达情况。结果:损伤6h后,(1)与模型组比较,药物组和电针组的CBS分值有极显著性差异(P<0.05);(2)和模型组比较,电针组、药物组脊髓组织的超氧化物歧化酶含量都显著上升(P<0.05),丙二醛和谷氨酸含量都显著降低(P<0.05);(3)模型组有266条基因的表达发生了显著的变化,差异表达基因涉及的功能与细胞毒性、神经组织的变性坏死、创伤性炎症和修复再生能力的丧失等有关。电针组有181条差异表达基因。在电针组差异表达而在模型组不出现差异表达的基因共51个,其中有36个上调,15个下调,这些差异表达的基因功能主要涉及创伤愈合、细胞代谢、离子通道稳态、免疫和防御功能、细胞骨架蛋白和细胞外基质、细胞生长发育等;(4)基因Capn8、Sphk1、Ccl2在电针组和模型组中表达上调,与芯片研究结果一致。结论:电针对脊髓损伤的治疗作用可能是通过升高超氧化物歧化酶含量,降低丙二醛、谷氨酸含量,来发挥电针对脊髓组织的保护作用。脊髓损伤后有大量的基因差异表达发生,基因Capn8、Sphk1、Ccl2的上调表达可能与脊髓损伤后超氧化物歧化酶升高及丙二醛、谷氨酸含量降低有关。电针可以调节SCI诱导的基因表达变化,了解电针后基因表达的变化对于深入研究电针抗脊髓损伤机制具有重要意义。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要(Abstract)
  • 缩略词英汉对照
  • 第一部分 文献综述
  • 1 脊髓损伤的动物模型研究及神经功能评定
  • 1.1 脊髓损伤动物模型
  • 1.2 脊髓损伤动物模型神经功能的评定
  • 2 脊髓损伤的机理研究
  • 2.1 脊髓损伤局部组织主要病理过程
  • 2.2 超氧化物歧化酶和丙二醛与脊髓损伤关系的研究
  • 2.3 谷氨酸与脊髓损伤关系的研究
  • 3 脊髓损伤的治疗
  • 3.1 针灸及中药疗法
  • 3.2 西药及其他疗法
  • 4 参考文献:
  • 第二部分 动物实验
  • 前言
  • 材料与方法
  • 1 实验材料
  • 1.1 动物
  • 1.2 针具
  • 1.3 主要试剂(盒)
  • 1.4 主要仪器设备
  • 2 实验方法
  • 2.1 动物分组
  • 2.2 造模(见图1)
  • 2.3 治疗
  • 2.4 检测项目及方法
  • 2.5 统计方法
  • 实验结果
  • 1 大鼠一般情况:
  • 2 CBS计分
  • 3 超氧化物岐化酶
  • 4 丙二醛
  • 5 谷氨酸
  • 6 基因芯片实验结果
  • 7 qRT-PCR验证结果
  • 讨论
  • 1 电针对脊髓损伤大鼠CBS行为学分值的影响
  • 2 电针对脊髓损伤大鼠脊髓组织超氧化物岐化酶和丙二醛含量的影响
  • 3 电针对脊髓损伤大鼠脊髓组织谷氨酸含量的影响
  • 4 基因芯片结果分析
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历
  • 附录
  • 相关论文文献

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