聚磺泥浆复合污染物降解菌的分离鉴定及降解特性研究

论文摘要

从四川井场采集聚磺体系废弃泥浆,采用稀释平板法,分离获得10株细菌,编号为JH1-JH10, JH2为球菌,其余菌株为杆菌；对其生理生化特性、分类地位和泥浆降解能力进行了研究。结果如下：（1）生理生化实验结果表明,JH3最适生长pH为7,最适生长温度为37℃,其余菌株最适生长pH为9,最适生长温度为28℃；供试菌株对碱和盐的耐受性较强,而碳氮源利用范围则较窄。（2）供试菌株均能以聚磺体系废弃泥浆为惟一碳源生长,且菌株的长势随泥浆添加量的增大而加强。以JH2为代表菌株,测定了其在不同泥浆添加量的液体培养基中菌体数,结果表明,在泥浆添加量为50g/L时,菌体数量最大,达到9.20×108cfu/mL。（3） 为了进一步确定菌株的分类地位,对其在分子水平上进行鉴定。以P1、P6为引物,测定了8个菌株的16S rDNA序列,应用MEGA5.0构建了16SrDNA系统发育树状图。结果表明,JH1、JH8、JH9和JH10与Bacillus halodurans DSM497T位于同一系统发育分支,JH8和JH9与B. halodurans DSM497T的相似性为100%；JH2同参比菌株Sinococcus qinghaiensis YIM 70212T的序列相似性为99.2%；JH3同参比菌株Belliella pelovolcani CC-SAL-25T的序列相似性为98.0%；JH4和JH6与Halomonas ventosae A112T相似性为98.8%。同时,供试菌株BOXAIR-PCR产物条带表明,菌株间的分类关系与16S序列相近,但同一系统发育分支下菌株间也有微小的差异。（4）按3%（V/V）的接种量接种供试菌株至60ml聚磺泥浆中振荡培养,测定泥浆中COD值和柴油含量变化,结合16S序列结果,筛选出5株优势降解菌株（分别为：JH2、JH3、JH4、JH6、JH9）进行下一步影响因素分析实验。（5）继而,探讨了优势菌株在不同接种量和不同初始pH下对泥浆中污染物的降解情况,结果表明：在3%接种量下菌株对泥浆中COD值和柴油含量的降解效果优于接种量为1%和5%；在自然pH条件下对泥浆中色度、COD值和柴油含量的降解效果优于调整初始pH为7的条件下。（6）最后,探讨了JH2和混合菌株在降解泥浆过程中主要阴离子浓度变化情况,结果表明,处理过程中,Cl-、NO3-和SO42-的浓度均逐渐增加,且混合菌株处理中的增加量多于JH2处理中的。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1. 前言
• 2 文献综述
• 2.1 废弃钻井泥浆概况
• 2.2 废弃钻井泥浆处理概况
• 2.3 生物技术处理油类污染物
• 2.3.1 动物处理
• 2.3.2 植物处理
• 2.3.3 微生物处理
• 2.3.4 微生物-植物联合处理
• 2.4 细菌分类地位研究
• 2.4.1 细菌表型特征研究
• 2.4.2 遗传特征研究
• 2.5 研究目的及意义
• 3 材料与方法
• 3.1 降解菌的分离及其分类地位研究
• 3.1.1 菌株的驯化
• 3.1.2 菌株的分离纯化
• 3.1.3 菌株生理生化特性研究
• 3.1.4 菌株遗传特性研究
• 3.2 供试菌株降解特性研究
• 3.2.1 降解菌对聚磺体系废弃泥浆的利用
• 3.2.2 菌株JH2在不同含量泥浆中的生长情况
• 3.2.3 优势菌株筛选
• 3.2.4 接种量对菌株降解效果的影响
• 3.2.5 初始pH对菌株降解效果的影响
• 3.2.6 聚磺泥浆接种供试菌株后主要阴离子浓度变化
• 4. 结果与分析
• 4.1 降解菌的分离及其分类地位研究
• 4.1.1 菌株的驯化分离
• 4.1.2 菌株生理生化特性研究
• 4.1.3 菌株遗传特性研究
• 4.2 供试菌株降解特性研究
• 4.2.1 菌株对聚磺体系废弃泥浆的利用
• 4.2.2 菌株JH2在不同含量泥浆中的生长情况
• 4.2.3 优势菌株筛选
• 4.2.4 接种量对菌株降解效果的影响
• 4.2.5 初始pH对菌株降解效果的影响
• 4.2.6 供试菌株对聚磺泥浆降解过程中主要阴离子浓度变化
• 5. 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.2 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 附录 实验中的16S rDNA序列