大鼠脊髓神经干细胞的分离、培养和鉴定

论文摘要

目的探讨出生1～3天SD大鼠脊髓神经干细胞的分离、培养及鉴定方法。建立了一种简便易行的NSCs获取方法,为进一步脊髓神经损伤修复的动物实验提供依据。方法取出生1～3天SD大鼠乳鼠脊髓,吸管吹打机械分离制成单细胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化,后于相差显微镜下进行形态学观察及免疫细胞化学进行鉴定。结果原代及传代培养均观察到形成细胞克隆,克隆中的细胞巢蛋白(nestin)表达阳性,显微镜下观察见典型的干细胞特征,诱导后可分化GFAP表达阳性的胶质细胞。结论分离和培养的细胞能表达神经干细胞的特异性标志物巢蛋白,并且具有很强的增殖能力和多向分化潜能,说明大鼠乳鼠脊髓中存在神经干细胞,并可用于进一步的实验研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 资料和方法
• 1. 材料
• 1.1 试验动物
• 1.2 主要实验设备及试剂
• 1.3 无血清NSCs 基础培养液基
• 1.4 PBS 缓冲液的配制
• 2. 方法
• 2.1 乳鼠的获取
• 2.2 脊髓神经干细胞的分离与培养
• 2.3 脊髓神经干细胞的传代
• 2.4 脊髓神经干细胞的鉴定
• 2.5 脊髓神经干细胞的分化
• 2.6 免疫细胞化学染色
• 2.7 脊髓神经干细胞形态学观察和纯度检测
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表