论文摘要
造血干细胞移植是治疗血液及免疫系统等疾病的主要手段,通过造血干细胞移植也可以为多种疾病提供动物模型,尤其是人造血干细胞移植小鼠建立的人源化血液系统小鼠模型为研究某些无法感染小鼠的人类疾病病毒提供有效途径。本研究从脐血中分离出人CD34阳性造血干细胞,分别通过骨髓移植、新生肝移植、宫内移植方法建立人源化造血系统小鼠模型。在小鼠移植后1个月至3个月检测人血细胞表面抗原CD45。新生肝移植后同时检测了髓系细胞表面抗原CD33、T淋巴细胞表面抗原CD3以及B淋巴细胞表面抗原CD19。通过人血细胞表面抗原的表达检测出小鼠体内人血液系统的重建情况。1、利用骨髓移植方法共移植12只NOD/SCID小鼠,阴性对照组4只,试验组8只。试验组小鼠均取得了人血液细胞的重建,1个月后检测外周血人CD45得到46.88%的重建率,3个月后骨髓中人血细胞重建率达到96.24%。试验结果证明通过骨髓移植人造血干细胞可以成功促进人造血细胞在小鼠体内的重建。2、通过新生肝移植方法共移植两窝16只NOD/SCID仔鼠,阴性对照组4只,试验组12只。阴性对照小鼠均在2周内死亡,未检测到人血细胞重建;试验组小鼠均检测到人血液细胞重建,有三只小鼠存活两个月以上。1个月后检测外周血人CD45得到26.8%的重建率,2个月后外周血重建率达到60.94%,骨髓重建率高达86.49%。2个月后脾脏内的人T、B、髓系细胞分别占4.29%、47.17%和5.4%;骨髓内的T、B、髓系细胞分别占0.25%、54.27%和23.5%;外周血内各系血细胞占的比例较低,T、B、髓系细胞分别占0.7%、26.42%和2.69%。试验结果证明了通过新生肝移植方法能够得到高效、全面的造血重建。3、在E8.5d宫内卵黄囊移植试验中,共获得健康出生仔鼠22只,除一只惺笾亟蚀锏?.34%,其他检测结果基本处于1%以下。通过E12.5d宫内腹腔移植得到健康出生小鼠8只,其中6只检测到人CD45阳性表达,但重建率总体低于卵黄囊移植得到的重建率。本研究同时进行了NOD/SCID胎鼠卵黄囊移植,获得健康出生的仔鼠11只,但重建比例亦低于1%。试验结果说明卵黄囊移植优于腹腔移植,但通过宫内移植得到的重建率低于其他移植方式。另外,本研究未发现免疫缺陷小鼠宫内移植对于造血重建的优越性。
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