论文题目: 西葫芦的离体雌核发育及植株再生
论文类型: 博士论文
论文专业: 蔬菜学
作者: 谢冰
导师: 王秀峰,樊治成
关键词: 西葫芦,未受精胚珠,离体培养,雌核发育,胚囊植株
文献来源: 山东农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 西葫芦是杂交优势比较显著的重要瓜类蔬菜之一,目前保护地栽培面积仅次于黄瓜。但是长期以来,由于自交系的选育周期长、工作量大,严重制约着西葫芦一代杂种的育种进程。所以,如何提高优良自交系的选育速度,成为西葫芦一代杂种育种的关键。经西葫芦未受精胚珠离体培养的单倍体育种途径,可以人工诱导西葫芦的离体雌核发育,从而快速获得单倍体以及双单倍体植株,进而迅速获得纯合的系统,为西葫芦优良自交系的选育提供有效的技术手段。未受精胚珠离体培养建立的再生体系也可以作为西葫芦遗传工程的理想受体系统,使隐性基因得以顺利表达。此外,诱导西葫芦的离体雌核发育所获得的再生胚囊植株群体,能够丰富西葫芦种质材料的变异,获得的双单倍体(DH)植株,可以作为分子标记及遗传图谱构建的适宜群体。因此,本研究选题具有重要的理论意义和实践意义。本文以西葫芦杂交组合1-SxG1、15xG1、15x23、20-3-9x17 以及双丰特早为供体材料,通过未受精胚珠的离体培养,成功地启动了西葫芦的离体雌核发育,获得了再生胚囊植株(R0),经严格单株自交,得到了胚囊植株二代株系(R1)。本文对西葫芦未受精胚珠离体培养所得到的胚状体的发育起源进行了胚胎学研究;通过大量的比较试验与数据分析,研究了影响胚状体诱导频率的主要因素及其相互关系;系统探索了西葫芦再生植株试管苗驯化、移栽的技术程序,在此基础上,对R0代群体的性状表现进行了观察;经R0 严格单株自交获得了R1株系,并对R1、R0、供体、杂交组合亲本之间的性状表现进行了比较研究。现将试验中得到的主要结论归纳如下: 1. 本研究建立了一套诱导频率较高、稳定的、可重复的西葫芦未受精胚珠离体培养的植株再生体系,筛选出了三种诱导效果比较理想的培养基配方,胚状体的诱导频率达9%-30%,频率高低因材料与其它诱导条件而异。2. 经形态学观察与胚胎学研究证明,本试验进行的西葫芦未受精胚珠离体培养经胚状体途径产生再生植株,因而健全再生植株的比例高,而且未出现白化苗。胚状体的发育起源于胚囊内位于珠孔端的卵器细胞,充分证明所获得的再生植株确为胚囊植株(R0),本研究建立的西葫芦未受精胚珠离体培养再生体系具有很高的利用价值和应用潜力。胚胎学的研究结论为西葫芦离体雌核发育的后续研究打下了重要的理论基础。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
第一章 引言
1.1 国内外研究概况
1.2 影响未受精子房、胚珠离体培养的主要因素
1.3 再生胚囊植株倍性的研究
1.4 再生胚囊植株发育起源的研究
1.5 再生植株性状遗传表现的研究
1.6 未受精子房及胚珠离体培养植株再生体系在实验生殖生物学、遗传学及分子生物学研究中的意义
1.7 本研究的目的及内容
第二章 西葫芦未受精胚珠离体培养再生体系的建立
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 第一阶段:胚状体诱导
1.2.2 第二阶段:植株再生
2 结果与分析
2.1 胚状体的形成
2.2 影响胚状体形成的主要因素
2.2.1 培养基成分
2.2.1.1 基本培养基
2.2.1.2 碳源种类及浓度的影响
2.2.1.3 外源激素种类及浓度的影响
2.2.1.4 胚珠发育时期的影响
2.2.1.5 供体基因型的影响
2.2.1.6 供体栽培季节的影响
2.2.1.7 培养基组成、接种时胚珠的发育时期(胚囊成熟度)、供体基因型等主要影响因素的主效及互作效应比较
2.2.1.8 培养方式
2.2.1.8.1 培养基形态
2.2.1.8.2 外植体组成
2.2.1.8.3 胚珠摆放方式
2.2.1.9 外植体的预处理
2.2.1.10 光照方式
2.3 植株再生
3 讨论
4 图版Ⅰ
第三章 西葫芦胚状体发育起源的研究
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果与分析
3 讨论
3.1 关于胚囊植株的起源
3.2 关于植物的孤雌生殖
4 图版Ⅱ
第四章 西葫芦再生植株试管苗驯化、移栽技术研究
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果与分析
2.1 再生试管苗驯化、移栽程序的建立
2.2 影响试管苗移栽成活率的主要因素分析
2.2.1 驯化时期的影响
2.2.2 驯化温度的影响
2.2.3 移栽培养土配方的影响
2.2.4 炼苗方式
3 讨论
4 图版Ⅲ
第五章 西葫芦再生胚囊植株当代(R0)及其自交后代的研究
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 R0植株的栽培
1.2.2 R0植株的性状观察
1.2.3 R0育性异常植株的花粉生活力测定
1.2.4 R1种子的获得
1.2.5 R0、R1、供体、杂交父本及母本的性状比较
2 结果与分析
2.1 R0性状表现的考察
2.2 R0育性异常植株的花粉生活力
2.3 R1性状表现的考察
3 讨论
3.1 R0代植株倍性推测及育性正常植株的倍性验证
3.2 关于再生胚囊植株的遗传规律与遗传倾向
3.3 关于再生胚囊植株的一些特异性状
4 图版Ⅳ
第六章 结论
参考文献
致谢
攻读博士学位期间发表论文
发布时间: 2005-10-11
参考文献
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