Rh血型的分析与化学修饰

论文题目: Rh血型的分析与化学修饰

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物化学与分子生物学

作者: 邱艳

导师: 章扬培

关键词: 红细胞,甲氧基聚乙二醇,血型,化学修饰

文献来源: 中国人民解放军军事医学科学院

发表年度: 2005

论文摘要: 对Rh血型不同表现型的比例、不同表型RhD抗原数量的多少、目前部分城市RhD(-)血液供应情况以及临床疑难配血产生的原因进行了调查分析和研究。采用不同分子量的七种甲氧基聚乙二醇(mPEG)衍生物修饰红细胞Rh抗原,比较不同的mPEG衍生物遮蔽红细胞Rh抗原的效果,建立Rh血型抗原的化学修饰工艺,以期解决我国稀有Rh血型的血液供应问题。对化学材料修饰后的红细胞各项体外指标进行了检测,探讨mPEG修饰对红细胞膜的结构功能是否产生影响,结合影响红细胞保存质量的因素研究结果,初步确定mPEG修饰红细胞的保存期。对mPEG与红细胞膜Rh抗原结合后是否稳定,进入人体后是否会脱落以及mPEG修饰红细胞的机理问题进行了初步的研究,为今后mPEG修饰红细胞临床应用打下基础。采用小鼠和猕猴为实验模型,用异硫氰酸荧光素标记法来确定mPEG-SPA修饰对输入体内后红细胞寿命和对受者安全性的影响,探索建立评价mPEG修饰后人红细胞的寿命和体内存活率的动物模型。利用mPEG-SPA修饰的红细胞与临床上收集的疑难配血病人的血清进行配血实验,一方面对目前临床上使用的不同输血前交叉配血方法是否可以直接应用于mPEG-SPA修饰红细胞的配血进行验证,另一方面从临床使用的角度观察修饰后的红细胞是否能供这些病人使用。

论文目录:

中文摘要

Abstract

缩略词表

前言

第一章 中国人Rh血型抗原的调查研究

1.1 前言

1.2 Rh血型D抗原不同表现型在人群中的分布

1.2.1 血液标本

1.2.2 试剂和仪器

1.2.3 方法

1.2.4 结果

1.3 Rh血型系统表现型分布

1.3.1 标本

1.3.2 试剂和仪器

1.3.3 方法

1.3.4 结果

1.4 不同表型RhD抗原数量的研究

1.4.1 标本

1.4.2 试剂和仪器

1.4.3 实验方法

1.4.4 结果

1.5 RhD(-)血液供应情况的调查

1.5.1 调查地区

1.5.2 结果

1.6 临床疑难输血病例的调查分析

1.6.1 研究人群

1.6.2 试剂和材料

1.6.3 方法

1.6.4 结果

1.7 讨论

第二章 Rh血型抗原化学修饰工艺的优化研究

2.1 前言

2.2 材料和方法

2.2.1 样品

2.2.2 主要试剂

2.2.3 仪器

2.2.4 实验方法

2.3 结果

2.4 讨论

第三章 mPEG修饰红细胞结构功能和保存期的研究

3.1 前言

3.2 血液保存条件的选择

3.3 样品来源和制备

3.4 红细胞结构功能的检测

3.4.1 pH值测定

3.4.2 K~+、Na~+浓度测定

3.4.3 红细胞渗透脆性的检测

3.4.4 血浆血红蛋白的测定

3.4.5 乙酰胆碱酯酶活性检测

3.4.6 红细胞ATP含量检测

3.4.7 红细胞2，3-DPG含量测定

3.4.8 P_(50)含量测定

3.4.9 最大变形指数(DI_(MAX))测定

3.5 统计学处理

3.6 实验结果

3.7 讨论

第四章 mPEG修饰红细胞Rh抗原机理和稳定性的研究

4.1 前言

4.2 Rh血型抗原蛋白结构与mPEG修饰膜蛋白的反应机理

4.2.1 Rh血型抗原一级结构的分析

4.3 mPEG修饰红细胞体外稳定性实验

4.3.1 实验材料与仪器

4.3.2 实验步骤

4.3.3 统计学处理

4.3.4 实验结果

4.4 mPEG修饰的红细胞血影凝集实验

4.4.1 实验材料与仪器

4.4.2 实验步骤

4.4.3 实验结果

4.5 SDS-PAGE电泳分析研究mPEG修饰的红细胞膜蛋白

4.5.1 实验材料与仪器

4.5.2 实验方法

4.5.3 实验结果

4.6 mPEG修饰红细胞膜蛋白红外光谱检测

4.6.1 实验材料

4.6.2 方法

4.6.3 实验结果

4.7 讨论

第五章 mPEG修饰红细胞的动物实验

5.1 前言

5.2 小鼠实验

5.2.1 实验材料与仪器

5.2.2 实验方法

5.2.3 统计学处理

5.2.4 实验结果

5.3 猕猴实验

5.3.1 实验材料与仪器

5.3.2 动物实验过程

5.3.3 实验结果

5.4 文献调研

5.5 讨论

第六章 mPEG修饰红细胞临床应用前的实验室交叉配血

6.1 前言

6.2 病例收集

6.3 实验材料与方法

6.3.1 试剂

6.3.2 方法

6.4 实验结果

6.5 讨论

总结

参考文献

致谢

简历

发布时间: 2005-09-05

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