香石竹内生真菌代谢液与多效唑在其保鲜中的应用

香石竹内生真菌代谢液与多效唑在其保鲜中的应用

论文摘要

本研究以植物微生态学原理为基础,分析香石竹切花的内生真菌区系,并对内生有益真菌的保鲜效应进行有益的探讨,以期找到适合香石竹(Dianthus Caryophyllus)切花保鲜的真菌种类及生物制剂,同时,采用栅栏技术(Hurdle technology)将生物保鲜剂与其他药剂复配使用以增强保鲜效果,提高安全性。主要研究结果如下:1探讨了香石竹内生真菌的分布及种群鉴定。从香石竹的花茎、花瓣及叶三部分共分离到37株内生真菌,其中22株不产孢。分离结果显示,不同部位内生真菌种群差异明显。花瓣、叶和茎的优势种群各不相同。花瓣和叶二者的共有种群相对较多,表明内生真菌在植物的不同部位不同组织中广泛分布。在实验中,我们还发现不同部位的香石竹内生真菌特有菌群往往数量十分有限。根据真菌的产孢结构特征和孢子的形态特征,对照《真菌鉴定手册》和《真菌分类学》进行鉴定,有16株分属于曲霉属(Aspergillus Micheli ex Fr.)、交链孢属(Alternaria Nees ex Wallr.)、青霉属(Penicillium LK.ex Fries)、镰孢属(Fusarium LK.ex Fr.)、丝核菌属(Rhizoctonia DC.ex Fr.)。2在同一实验环境条件下,从香石竹体内分离到的F1、F5、F14以及L14菌株粗提液对香石竹切花具有良好的保鲜效果,说明香石竹切花内生真菌中存在对切花保鲜具有积极作用的有益真菌。再进行进一步抗菌以及抗氧化分析后,发现F5菌株氯仿粗提液不但能产生抗菌物质,而且具有良好的超氧离子清除能力,是优良的保鲜剂配方之选。故选取F5菌株氯仿粗提液5个浓度水平(0、0.5%、1%、2%、3%),采用栅栏技术与PP3336个浓度水平(0、25、50、100、200、500mg/L)进行两因素实验,结果显示:在同一条件下,单独使用低浓度代谢液能有效延长香石竹切花的瓶插寿命,增加花朵直径,改善切花体内水分状况,提高观赏品质,其中以0.5%浓度为最佳。高浓度代谢液对切花有负面作用,随着浓度的增加,切花表现为花朵直径减小,鲜重下降,瓶插液浑浊,观赏品质下降,切花茎中部折断。而单独使用PP333各浓度在保鲜效果上(除100mg/L浓度处理外)与对照并无显著差异,高浓度PP333对切花瓶插有抑制作用,具体表现为花径小,甚至低于对照;瓶插寿命短;花朵鲜艳度低。但其瓶插液较为清澈,说明其杀菌效果较好。复配实验结果显示,100mg/L+0.5%保鲜效果最佳,瓶插寿命最长,但其与0.5%单独使用所观测到的各项瓶插指标并无显著差异。3对100mg/L+0.5%、0.5%保鲜液的保鲜效果做生理生化指标的进一步分析,结果显示:0.5%及100mg/L+0.5%处理可延缓切花蛋白质的降解速率。有效降低和减缓花瓣的O2-产生速率,使切花保持较高的SOD活性。同时,两处理过氧化物酶带谱在整个瓶插期间均比对照带谱浅且窄,特别是在瓶插后期,这与我们观察到的两处理SOD酶带变化相符,说明保鲜液能有效防止切花质膜的过氧化。4本实验结果表明单独用F5代谢液0.5%浓度作为瓶插液处理香石竹,瓶插寿命分别15.9天,与对照(10.2天)相比,其保鲜效果显著。而单独使用多效唑处理,其最好效果为100mg/L浓度,瓶插寿命为13.2天,效果稍好与对照,但仍不及F5代谢液0.5%浓度处理,当使用100mg/L+0.5%处理时,瓶插寿命为16.1天,虽然效果明显好于对照,但与单独使用0.5%代谢液的效果差异不显著。说明两者并不具备最佳的协同效应,这一点从生理指标的测定结果中也有所反应。具体原因以及对于复配保鲜液新组合的选择还有待进一步的研究分析。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 1 文献综述
  • 1.1 香石竹切花衰老生理的研究现状
  • 1.1.1 水分平衡
  • 1.1.2 呼吸作用
  • 1.1.3 活性氧代谢
  • 1.1.4 脂类代谢
  • 1.1.5 乙烯
  • 1.1.6 ABA
  • 1.1.7 细胞分裂素
  • 1.1.8 多胺
  • 1.1.9 细胞壁变化
  • 1.2 香石竹切花保鲜技术研究现状
  • 1.2.1 贮藏保鲜技术
  • 1.2.2 保鲜剂处理技术
  • 1.2.3 保鲜新技术
  • 1.3 植物内生真菌及其活性代谢产物研究进展
  • 1.3.1 抗菌活性化合物
  • 1.3.2 植物激素
  • 1.3.3 抗氧化活性物质
  • 1.4 多效唑在切花保鲜上的运用
  • 2.研究内容与技术路线
  • 2.1 研究内容
  • 2.2 技术路线
  • 3.材料与方法
  • 3.1 香石竹内生真菌的分离、纯化、鉴定
  • 3.1.1 供试材料
  • 3.1.2 实验方法
  • 3.2 香石竹内生真菌次生代谢产物的提取与筛选
  • 3.2.1 香石竹内生真菌次生代谢产物的提取
  • 3.2.2 具有保鲜效果的香石竹内生真菌次生代谢产物的筛选
  • 3.3 有益内生真菌代谢产物活性的初步研究
  • 3.3.1 有益内生真菌代谢产物的抗菌活性
  • 3.3.2 有盖内生真菌代谢产物抗氧化活性研究(超氧阴离子自由基清除活性的测定)
  • 3.4 复配保鲜剂最佳浓度配比的确定
  • 3.4.1 材料和方法
  • 3.4.2 实验设计
  • 3.5 最佳保鲜剂配方对香石竹切花的保鲜机制研究
  • 3.5.1 实验材料
  • 3.5.2 实验方法
  • 4.结果与分析
  • 4.1 香石竹内生真菌的鉴定
  • 4.1.1 曲霉属(Aspergillus Micheli ex Fr.)
  • 4.1.2 交链孢属(Alternaria Nees ex Wallr.)
  • 4.1.3 青霉属(Penicillium LK.ex Fries)
  • 4.1.4 镰孢属(Fusarium LK.ex Fr.)
  • 4.1.5 丝核菌属(Rhizoctonia DC.ex Fr.)
  • 4.2 具有保鲜效果的香石竹内生真菌次生代谢产物的筛选
  • 4.3 有益内生真菌代谢产物活性的初步研究
  • 4.3.1 有益内生真菌代谢产物的抗菌活性
  • 4.3.2 有益内生真菌代谢产物抗氧化活性研究(超氧阴离子自由基清除活性的测定)
  • 4.4 复配保鲜剂最佳浓度配比的确定
  • 4.4.1 通过瓶插寿命指标对优选配方的粗筛确定
  • 4.4.2 粗筛优选配方对切花水分平衡值的影响
  • 4.4.3 粗筛优选配方对切花花枝鲜重值的影响
  • 4.4.4 粗筛优选配方对切花花径变化的影响
  • 4.4.5 复配保鲜剂最佳浓度配比的确定
  • 4.5 最佳保鲜剂配方对香石竹切花保鲜机制的研究
  • 4.5.1 香石竹各部分含水量测定
  • 4.5.2 保鲜液对香石竹可溶性蛋白含量的影响
  • 2-产生速率的影响'>4.5.3 保鲜液对香石竹O2-产生速率的影响
  • 4.5.4 保鲜液对香石竹花青素含量的影响
  • 4.5.5 保鲜液对香石竹花瓣中SOD和POD同工酶的影响
  • 4.5.6 保鲜液对香石竹花瓣DNA、RNA含量的影响
  • 5.讨论与结论
  • 5.1 香石竹内生真菌的分离、纯化、鉴定
  • 5.2 香石竹有益内生真菌的筛选
  • 5.3 香石竹保鲜剂复配浓度的筛选
  • 5.4 优选保鲜液对香石竹切花衰老生理的影响
  • 5.4.1 保鲜液对香石竹水分平衡及瓶插指标的影响
  • 5.4.2 保鲜液对香石竹蛋白质降解的影响
  • 5.4.3 保鲜液对香石竹花瓣膜脂过氧化的影响
  • 5.4.4 香石竹保鲜液中代谢液与多效唑的协同效应研究
  • 5.4.5 生物保鲜剂发展前景展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 论文发表情况
  • 相关论文文献

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