人神经母细胞瘤辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢酶选择性剪接亚型的研究

论文摘要

目的 全反式维甲酸是具有重要生理功能的激素类样物质,体内生理浓度很低。维甲酸是由维生素A（Vitamin A）也称视黄醇（Retinol）经两步代谢而成,中间产物为视黄醛。辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢酶/视黄醛还原酶（NADP（H）-deperldent retinol dehvdrogerlases/reductases,NRDR）是黄东阳教授1997年最先从兔肝中发现并纯化鉴定的重要的维生素A 代谢酶（Huang and Ichikawa,1997）,是短链脱氢酶家族的一个重要成员,广泛表达于哺乳动物的各种组织中。人与一些主要哺乳动物的NRDR cDNA都已相继被克隆。最近作者所在课题组从人肝克隆了一种选择性剪接亚型NRDRiso（AY071856）（Du et al,2004）,提示选择性剪接可能在NRDR基因的功能调节中发挥重要作用,同时提示不应该排除该基因有其他选择性剪接形式的存在可能性。 神经母细胞瘤（neuroblastoma）是最常见的小儿恶性实体性肿瘤之一,源于胚胎期神经脊的交感肾上腺系统。维甲酸能在体外诱导人神经母细胞瘤细胞株分化引起轴索形成和轴突生长。外源性维甲酸能够诱导神经母细胞瘤细胞株向正常细胞分化使我们有理由探讨细胞中内源性（生理性）维甲酸产生障碍的可能性。最近已有数据显示,异常的选择性剪接与肿瘤发生发展相关。如果神经母细胞瘤内NRDR2选择性剪接异常导致异常蛋白的产生,可以使正常的NRDR减少从而阻碍内源性维甲酸的生理合成。因此研究神经母细胞瘤NRDR选择性剪接异常可能有助于我们了解神经母细胞瘤发生发展的机制。方法 我们用PCR、RACE的方法从人神经母细胞瘤SK-N-SH克隆了23个新的NRDR选择性剪接亚型,对其中humNRDRA2进行了绿色荧光蛋白亚细胞定位。对23个新的NRDR选择性剪接亚进行生物信息学分析.同时分析了NRDR的基因结构. 结果 人NRDR基因有三个拷贝,分别为DHRS4,DHRS4L2与DHRS4X.其中前二者相似性为97.5%,属于片段复制（Segmental Duplication）（90%-98%;≥1 kb）.三拷贝间有插入片断分别命

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语
• 第一章 前言
• 第二章 辅酶II依赖性视黄醇脱氢酶的基因结构分析
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果
• 2.4 结论
• 第三章 人神经母细胞瘤辅酶II依赖性视黄醇脱氢酶选择性剪接亚型的克隆及分析
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 2.5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历