论文摘要
目的：探讨肿瘤干细胞标志物CD44和CD166在原发性结直肠癌组织中的表达、相互关系及其临床病理意义,进一步观察结直肠癌干细胞CD44+/CD166+在正常肠粘膜、腺瘤及结直肠癌组织中的数量、位置、分布方式及形态特征,并分析其临床病理意义。观察结直肠癌干细胞标志物CD44和CD166在人结直肠癌细胞系（SW480）中的表达及形态特点。方法：取61例结直肠癌、10例正常肠粘膜组织及18例伴不典型增生的结直肠腺瘤制成42点的共三块组织芯片,应用免疫组化S-P法检测结直肠组织芯片中CD44和CD166蛋白的表达。应用常规HE染色、免疫组织化学染色及免疫组织化学双重染色方法,定位标记CD44和CD166双阳性细胞,并在HE染色切片的对应位置上观察其形态特征。采用流式细胞仪分析人结直肠癌细胞系SW480连续三代细胞所处的周期,利用HE、免疫组化技术观察阳性细胞的形态特点及表达。结果：1.结直肠癌组织中CD44和CD166的表达明显高于其在正常肠粘膜组织和伴不典型增生的结直肠腺瘤中的表达；在结直肠癌中,CD44的表达与病理分级及浸润深度有关（X2=19.882,6.459,P<0.05）,CD166的表达与病理分级及浸润深度有关（X2=10.802,8.041,P<0.05）,CD44与CD166在结直肠癌中的表达呈正相关（r=0.333 P=0.009<0.01）。2.正常肠黏膜中未见CD44+/CD166+细胞；在伴不典型增生的腺瘤中可见极少量CD44+/CD166+细胞；结直肠癌组织中可见到少量的双阳性细胞,数量约占肿瘤细胞的5%-15%,沿腺管的基底侧呈灶状或散在分布：细胞呈圆形或短梭形,胞浆稀少,胞核规则,呈卵圆形或高柱状。双阳性细胞在癌组织中的表达明显高于其在腺瘤中的表达（P<0.01）,随着结直肠癌分化程度的降低,数量增多（r=0.449 P=0.000<0.01）,随着浸润深度的加深,双阳性细胞的数量增多（r=0.291P=0.023<0.05）3.人结直肠癌细胞系SW480细胞有两种形态,一种为大多边形,胞浆丰富,大的不规则核,染色质粗糙；另一种为小圆形或小梭形,胞浆较少,核致密深染；CD44和CD166呈胞浆黄染。小圆形细胞大约占肿瘤细胞的10-20%,且与结直肠癌实体瘤中的圆形细胞形态相似,可能为肿瘤干细胞。结论：1.CD44与CD166作为结直肠癌干细胞的表面标记物与结直肠癌的分化程度及浸润程度密切相关,且两者互为协同作用,同步检测二者在结直肠癌组织中的表达并综合分析两者之间的关系对评价结直肠癌的生物学行为具有一定价值。2.双阳性细胞数量约占肿瘤细胞的5%-15%,沿腺管的基底侧呈灶状或散在分布；细胞呈小圆形或短梭形,胞浆稀少,胞核规则,呈卵圆形或高柱状。且分化程度越低,数量越多。观察结直肠癌干细胞的数量、位置、分布方式、苏木精-伊红染色形态,并分析其与结直肠癌病理参数的关系,可为结直肠癌的病理诊断和分期、预后评估及临床治疗提供参考。3.人结直肠癌细胞系SW480中的小圆形细胞与结直肠癌实体瘤中的圆形细胞的形态和CD44与CD166免疫标记特征相同,具备肿瘤干细胞的特征。
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标签：结直肠癌论文; 肿瘤干细胞论文; 组织芯片论文; 免疫组织化学法论文; 免疫组织化学双重染色论文;